应用实时荧光定量pcr技术检测常染色体隐性遗传性早发型帕金森.pdf

中南大学学报（医学版） 　２０１０，３５（５）　　ｈｔｔｐ：／／ｘｂｙｘ．ｘｙｓｍ．ｎｅｔ ４３８ ＪＣｅｎｔＳｏｕｔｈＵｎｉｖ（ＭｅｄＳｃｉ） 应用实时荧光定量ＰＣＲ技术检测常染色体 隐性遗传性早发型帕金森综合征的 ＤＪ１基因外显子重排突变 １，２ ２ ２ ２ １ ２ ２ ２ ２ 张海南 ，肖彬 ，聂利珞 ，郭纪锋 ，王春喻 ，王磊 ，何丹 ，严新翔 ，唐北沙 （中南大学　１．湘雅二医院神经内科，长沙４１００１１；２．湘雅医院神经内科，长沙４１０００８） ［摘要］　目的：建立应用实时荧光定量 ＰＣＲ技术（ｒｅａｌｔｉｍｅｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ｒｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ）检 测ＤＪ１基因外显子重排突变的技术平台，并应用该技术对常染色体隐性遗传性早发型帕金森综合征 （ａｕｔｏｓｏｍａｌｒｅｃｅｓｓｉｖｅｅａｒｌｙｏｎｓｅｔＰａｒｋｉｎｓｏｎｉｓｍ，ＡＲＥＰ）ＤＪ１基因进行外显子重排突变分析。方法：应用实时 荧光定量 ＰＣＲ分析方法，对２２个 ＡＲＥＰ家系先证者和 ３０个正常对照的ＤＪ１基因进行外显子重排突变 分析。结果：本研究中获得了扩增效率和特异性均满意的ＤＪ１基因各编码外显子实时荧光定量 ＰＣＲ反 应条件及各外显子引物；本组 ＡＲＥＰ患者未发现 ＤＪ１基因的外显子重排突变。结论：建立了应用实时 荧光定量 ＰＣＲ技术进行 ＤＪ１基因外显子重排突变检测的技术平台；中国人群 ＡＲＥＰ患者 ＤＪ１基因外 显子重排突变可能罕见。 ［关键词］　 常染色体隐性遗传性早发型帕金森综合征；　ＤＪ１基因；　外显子重排突变；　实时 荧光定量 ＰＣＲ ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２７３４７．２０１０．０５．００６ ＤＪ１ｇｅｎｅｒｅａｒｒａｎｇｅｍｅｎｔｍｕｔａｔｉｏｎｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈａｕｔｏｓｏｍａｌｒｅｃｅｓｓｉｖｅｅａｒｌｙｏｎｓｅｔ ｐａｒｋｉｎｓｏｎｉｓｍｕｓｉｎｇｒｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ １，２ ２ ２ ２ １ ２ ＺＨＡＮＧＨａｉｎａｎ ，ＸＩＡＯＢｉｎ，ＮＩＥＬｉｌｕｏ，ＧＵＯＪｉｆｅｎｇ，ＷＡＮＧＣｈｕｎｙｕ，ＷＡＮＧＬｅｉ， ２ ２ ２ ＨＥＤａｎ，ＹＡＮＸｉｎｘｉａｎｇ，ＴＡＮＧＢｅｉｓｈａ （１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＮｅｕｒｏｌｏｇｙ，ＳｅｃｏｎｄＸｉａｎｇｙａＨｏｓｐｉｔａｌ，ＣｅｎｔｒａｌＳｏｕｔｈＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１００１１； ２．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＮｅｕｒｏｌｏｇｙ，ＸｉａｎｇｙａＨｏｓｐｉｔａｌ，ＣｅｎｔｒａｌＳｏｕｔｈＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１０００８，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　ＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｔｅｃｈｎｉｑｕｅｐｌａｔｆｏｒｍｏｆＤＪ１ｇｅｎｅｅｘｏｎｒｅａｒｒａｎｇｅｍｅｎｔ ｕｓｉｎｇｒｅａｌｔｉｍｅＰＣＲａｎｄｔｏａｎａｌｙｚｅＤＪ１ｇｅｎｅｅｘｏｎｒｅａｒｒａｎｇｅｍｅｎｔｍｕｔａｔｉｏｎｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈａｕｔｏｓｏｍａｌ ｒｅｃｅｓｓｉｖｅｅａｒｌｙｏｎｓｅｔＰａｒｋｉｎｓｏｎｉｓｍ（ＡＲＥＰ）．Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＲｅａｌｔｉｍｅＰＣＲｗａｓｕｓｅｄｔｏａｎａｌｙｚｅＤＪ１