敬钊毒素-Ⅱ及钠通道1.5作用的分子机制的分析研究.pdfVIP

中文摘要 敬钊毒素．II(JZTX．II)是一种从敬钊缨毛蛛粗毒的毒液中分离 纯化而得到的由32个氨基酸组成分子量为3561．13Da的多肽毒素， 包含6个半胱氨酸形成3对二硫键，属于ICK模体结构。通过Edman CDNFSCQPAIKWCIWSP。 本实验室前期研究结果表明，JZTX．II对大鼠心肌细胞具有选择 性作用，延缓其河豚毒素不敏感(T1Ⅸ．R)钠通道的失活，对大鼠 DIⅪ神经元上的钠通道有微弱的影响，对大脑中的钠通道几乎没有 作用。然而，我们并不知道JZTX．II作用于哪个特定的钠通道亚型以 及其作用的分子机制。在四个所检测的电压敏感钠通道亚型中， 4-4 nM)，与rNavl．3 JZTX-II对hNavl．5的作用是最强的(EC50=125 相比作用要强10倍，毒素对rNavl．4和hNav．7有非常微弱的作用。 动力学相关实验结果显示，虽然JZTX．II抑制Navl．5电流失活，但 是对其稳态失活没有影响。O．5．州毒素处理使Navl．5最大峰电流的 mV，但是对通道的起始激活电压 激活电压朝超极化方向漂移了约10 更容易被激活，并且其不改变通道的离子选择性。此外，JZTX．II加 快了Navl．5通道从快失活状态恢复的速度，减少了通道失活的数量， 缩短了通道从失活状态到关闭状态的过渡期。实验结果还表明，毒素 T 万方数据 从toxin．Navl．5复合体上的解离是电压依赖性的，更强的去极化电压 处理能引发更快的解离。相比于解离曲线的电压依赖性，JZTX．II的 重新结合表现出非电压依赖性，不同的复极化电压对毒素重新结合的 动力学影响不明显。嵌合体实验分析表明，Navl．5第四个结构域 重要的作用。单点突变实验分析表明，一些位于Navl．5DIV的S1．S2 理，与alpha蝎毒素相类似，JZTX．II与神经毒素受体位点3相结合。 关键字：JZTX．II，失活，钠通道1．5，作用机制 II 万方数据 Abs仃act a32-residuetoxinisolatedfrom Jingzhaotoxin-II(JZTX—II)ispeptide Chinesetarantula venomwithamolecular Chilobrachysjingzhao weight of3561．13Da．Itcontainssix whichformthreedisulfidebond cysteines and totheICKmotif．Theaminoacid ofJZTX—11 belongs sequence was determinedtobe by Edman degradation． Inour showedthatJZTX—II previousstudy，we preferentially inhibitsinactivationof oncardiac ra