iPDMS微阵列技术应用于非小细胞肺癌诊疗的探究.pdf

中文摘要 iPDMS 微阵列技术应用于非小细胞肺癌诊疗的研究 iPDMS 微阵列技术应用于非小细胞肺癌诊疗的研究 中文摘要 目的 探讨新型固体支撑材料改性聚二甲基硅氧烷（ Integrated Poly(dimethysiloxane) ，iPDMS ）多肽微阵列和蛋白微阵列技术应用于非小细胞肺癌 （non-small cell lung cancer，NSCLC ）诊疗的研究。 方法 第一部分 对p53 和EGFR 胞外段的序列进行叠瓦式切割，构建高内涵精细 多肽库，建立iPDMS 多肽微阵列检测方案；对150 例NSCLC 患者和96 例健康对照 者进行血清p53 和EGFR 多肽自身抗体的大规模筛选；应用传统生物信息学手段进行 分析研究，确定血清p53 和EGFR 自身抗体所识别的线性抗原表位位点，探讨其潜在 的研究价值。 第二部分 采用iPDMS 蛋白微阵列法定量检测50 例NSCLC 患者、50 例健康对 照者血清IL-6、IL-8、MCP-1、GM-CSF 的水平，结合NSCLC 患者不同临床病理参 数进行分析。 结果 第一部分 p53 和EGFR 多肽的自身抗体既存在于NSCLC 患者血清中，也 存在于健康对照组的血清中，微阵列芯片表达差异显著分析（Significance analysis of microarrays ，SAM）显示在NSCLC 组和健康对照组血清中存在针对4 条p53 多肽和 2 条EGFR 多肽的差异表达的自身抗体，这6 条多肽的自身抗体在NSCLC 患者血清 的响应明显高于健康对照组（P0.05 ），对这6 条具有潜在诊断价值的多肽进行受试 者工作特征曲线 （Receiver operator characteristic curve，ROC ）分析发现多指标联合 的诊断模型具有更高的诊断效率，由此得到了一个由 p53-02 ，p53-04 ，p53-05 和 EGFR-48 构成的多指标联合诊断模型，该组合模型在特异度为 90%时能达到 36.7% 的灵敏度。线性抗原位点分析发现，血清p53 自身抗体的主要识别氨基端（N 端）和 羧基端（C 端）的线性表位，而非中央热点突变区，而血清EGFR 自身抗体识别的高 频位点集中分布在EGFR 胞外段L2 和S2 结构域。 Ⅰ iPDMS 微阵列技术应用于非小细胞肺癌诊疗的研究 中文摘要 第二部分 与健康对照组相比，NSCLC 患者血清IL-6、IL-8、GM-CSF 水平显著 升高（P0.01 ），MCP-1 水平升高（P0.05 ），差异有统计学意义；与I+II 期患者相比， III+IV 期患者血清IL-6 水平显著升高（P0.01 ），血清MCP-1 水平降低（P0.05 ）， 血清GM-CSF 水平显著降低（P0.01 ），差异有统计学意义，血清IL-8 水平的差异无 统计学意义（P0.05 ）；与无淋巴结转移的患者相比，有淋巴结转移的患者血清IL-6 水平升高（P0.05 ），差异有统计学意义，血清IL-8、MCP-1、GM-CSF 水平的差异 无统计学意义（P0.05 ）；与肺鳞癌患者相比，肺腺癌患者血清IL-8 水平升高（P0.05 ）， 差异有统计学意义，血清IL-6、MCP-1、GM-CSF 水平的差异无统计学意义（P0.05 ）。 结论 1. NSCLC 组和健康对照组之间存在差异性表达的p53 和EGFR 多肽自身抗体， 可通过iPDMS 多肽微阵列技术加以检测。基于p53 和EGFR 多肽库的NSCLC 诊断 模型展示出了一定的临床应用前景。iPDMS 多肽微阵列技术为p53 和EGFR 线性表 位的精细定位研究提供了强有力的工具。 2. 血清IL-6、IL-8、MCP-1、GM-CSF 水平的改变与NSCLC 的发生、发展密切 相关，其血清学定量检测不仅有助于了解 NSCLC 患者的免疫功能状态，而且对 NSCLC 分期、分型具有一定参考价值。 3. iPDMS 微阵列技术小型化、高通量、多指标、低成本的特点为免疫学