紫外-可见分光光度法1.pptVIP

目录 1.概述及基本原理 2.紫外可见分光光度计 3.紫外可见吸收光谱的应用 4.实验条件的选择 一、概述及基本原理 1.概述 紫外-可见吸收光谱是分子的价电子在分子轨道间跃迁产生的，这种方法是通过被测物质在紫外-可见光区的特定波长或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析。 1.1基本概念 （1）发色团 分子中能吸收紫外光或可见光的结构系统叫做发色团或色基。如C=C、C=O、C≡C等都是发色团。发色团的结构不同，电子跃迁类型也不同。 （2）助色团 有些原子或基团，本身不能吸收波长大于200nm的光波，但它与一定的发色团相连时，则可使发色团所产生的吸收峰向长波长方向移动。并使吸收强度增加，这样的原子或基团叫做助色团。 （3）红移和蓝移 某些有机化合物因反应引入含有未共享电子 对的基团使吸收峰向长波长移动的现象称为红移，这些基团称为向红基团；相反，使吸收峰向短波长移动的现象称为蓝移，引起蓝移效应的基团称为向蓝基团。另外，使吸收强度增加的现象称为浓色效应或增色效应，使吸收强度降低的现象称为淡色效应。 1.2基本原理 1.2.1物质对光的选择吸收性 1.2.2光的吸收定律 （1）朗伯-比耳定律 布格(Bouguer)和朗伯(Lambert)先后于1729年和1760年阐明了光的吸收程度和吸收层厚度的关系：A∝b A＝lg（I0/It)= εb c 式中A：吸光度；描述溶液对光的吸收程度； b：液层厚度(光程长度)，通常以cm为单位； c：溶液的摩尔浓度，单位mol·L-1； ε：摩尔吸光系数，单位L·mol-1·cm-1； 或A＝lg（I0/It)= abc c：溶液的浓度，单位g·L-1; a：吸光系数，单位L·g-1·cm-1 . 二、紫外可见分光光度计 1.仪器的基本部件 （1）光源：提供入射光源，可见光区：钨灯作为光源，其辐射 波长范围在320～2500 nm；紫外区：氢、氘灯， 发射180～375 nm的连续光谱。 （2）单色器：将光源发射的复合光分解成单色光并可从中选出 任意波长的单色光的光学系统。 （3）样品池：样品室放置各种类型的吸收池（比色皿）和相应 的池架吸附。吸收池主要有石英池和玻璃池两种, 在紫外区须采用石英池，可见区一般用玻璃池。 （4）检测器：利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测 的电信号，常用的有光电池、光电管或光电倍 增管。 （5）结果显示记录系统：检流计、数字显示、微机进行仪器自 动控制和结果处理。 2.紫外-可见分光光度计的分类 单光束分光光度计 简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光度，一般不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测器具有很高的稳定性。 双光束分光光度计 自动记录，快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析。仪器复杂，价格较高。 双波长分光光度计 将不同波长的两束单色光(λ1、λ2) 快速交替通过同一吸收池而后到达检测器。产生交流信号。无需参比池。△?=1～2nm。两波长同时扫描即可获得导数光谱。 3.测定过程 由光源发出的光，经单色 器获得一定波长单色光照射到样品溶液，被吸收后经检测器将光强度变化转 变为电信号变化，并经信号指示系统调制放大后，显示吸光度A（或透射比T)。 3.紫外可见分光光谱的应用 3.1定性分析 有机化合物的鉴定 先扫描未知化合物的吸收光谱，然后根据其吸收光谱的特征（吸收峰的数目、形状、位置、相对强度）与相同条件下扫描得到的已知纯化合物的吸收光谱进行比较而定性。 有机化合物结构的分析 先将化合物的紫外—可见吸收光谱扫描出来，然后根据其吸收谱带及最大吸收波长处吸收值的大小，可推断出该化合物的主要基团及其所在位置。 化合物纯度的检验 将纯化合物的吸收光谱与含杂质化合物的吸收光谱进行比较，根据两者吸收光谱的差异进行纯度检验。对杂质检验的灵敏度取决于化合物与杂质间吸收系数的差异。 3.2定量分析 3.2.1单组分定量分析 （1）标准曲线法