大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位基因工程菌发酵工艺的研究.PDFVIP

第 27 卷第 2 期 第 　三 　军 　医 　大 　学 　学 　报 Vol. 27 , No. 2 　　　　 　　　　 2005 年 1 月 ACTA 　ACADEMIAE 　MEDICINAE 　MILITARIS 　TERTIAE Jan. 2005 115 ( ) 文章编号 2005　　 论著 大肠杆菌不耐热肠毒素 B 亚单位基因工程菌发酵工艺的研究 (第三军医大学医学检验系临床微生物与免疫学教研室 ,重庆 400038) 田文标,邹全明 ,张卫军 　　 ( ) 提 　要 : 目的 　研究建立大肠杆菌不耐热肠毒素 B 亚单位 LTB 基因工程菌的发酵工艺。方法 　先通过摇瓶培养初步确 定工程菌的最适生长条件 ,然后以此为基础在发酵罐中比较、筛选影响菌体生长和目的蛋白表达率的各种条件 ,并进一步 对发酵工艺进行改良优化。结果 　经试验确定了 rLTB 基因工程菌发酵罐培养的各项条件的最佳组合 ,优化后工程菌菌 体产量平均可达 405 g/ L , 目的蛋白的表达率平均为306 % 。结论 　建立了稳定、高效的工程菌发酵工艺。 　　关键词 : 产毒素性大肠杆菌 ;不耐热肠毒素 B 亚单位 ;发酵 　　中图法分类号 : R378. 21 ; TQ460. 38 　　　 文献标识码 : A Fermentation technology in heatlabile enterotoxin B subunit of genetic recombinant E . coli TIAN Wenbiao , ZOU Quanming , ZHANG Weijun (Department of Clinical Microbiology , College of Medical Laboratory Science , Third Military Medical University , Chongqing 400038 , China) 　　Abstract : Objective 　To investigate the fermentation conditions for the heatlabile enterotoxin B subunit (LTB) of genetic recombinant E. coli . Methods 　The effects of different kinds of media , the range of pH , the in duction time , the glucose concentration , and the fedbatch on LTB level in 10liter fermenter under the condition of cascade controlling dissolved oxygen content were analyzed. Re sults 　Under the established conditions , the cell out put per liter was 40. 5g , and the expression level was 30. 6 %. Conclusion 　The results indicate that the stable fer mentation technology with high e