流感病毒临床标本的采集方法运输保存处理.pptVIP

人感染H7N9禽流感病毒标本采集、保存、检测及结果反馈 临床样本的选择 采样对象： 1.监测病例：同时具备以下4项条件的病例： （1）发热(腋下体温≥38℃)； （2）具有肺炎的影像学特征； （3）发病早期白细胞总数降低或正常,或淋巴细胞分类计数减少； （4）不能从临床或实验室角度诊断为常见病原所致肺炎。 2.疑似及确诊病例：参照《人感染H7N9禽流感诊疗方案（2013年第1版）》（卫发明电〔2013〕5号） 最佳采集时间：病人发病急性期,即发病的头7天 采样液的要求 标本采集后应立即放入适当的采样液中低温保存 应包含有一定量的营养物质及蛋白质（维持病毒活性）和抗菌素（抑制杂菌生长）。 最佳采样液：Hank’s液，Eagel’s液 推荐：专用病毒样本采集管 专用病毒样本采集管 临床标本的采集 常采集的标本类型 上呼吸道标本（包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液和鼻洗液） 下呼吸道标本（如气管吸取物、肺洗液、肺组织标本） 血清标本（急性期/恢复期） 肺组织、气管、支气管组织标本 （死亡病例） 标本采集量及分装 呼吸道标本每份分为3 管/每管不少于1ml 血清标本每份分为2 管/每管不少于0.5ml 2 ml螺口带盖塑料管 (不可用1.5ml离心管代替) 临床样本收集的注意事项 操作要细心，严防标本间交叉污染，要做好自我保护 采集标本要有一定力度 标本采集后应迅速至于冰上或者4 ℃以下保存，因为流感病毒对热很敏感 标本管上写明：医院名称，标本号，患者姓名，性别， 采样日期 标本采集后尽量在24小时内送到实验室进行病毒分离。24小时内未能进行病毒分离的标本应放-70 ℃或以下 临床标本运送、包装 根据《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》和《人间传染的病原微生物名录》的有关规定，人禽流感标本应当由不少于两人的专人专车护送，并采取相应的防护措施，不得通过公共电（汽）车和城市铁路运输（运送前要取得卫生行政部门的审批文件） 按照生物安全的相关规定进行包装（A/UN2814；B/UN3373） 在24 小时内送到当地流感监测网络实验室进行检测 临床标本的处理原则 标本至实验室后，病毒分离标本应尽快进行接种分离，24-48h内能进行接种的可置于4℃保存，如未能接种应置-70℃或以下保存。 血清标本可在4℃存放一周，长期保存置 -20℃或以下。 标本的实验室检测 人感染H7N9禽流感疫情防控方案（第一版） 附件2： 人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实验室检测策略 人感染H7N9禽流感病例诊断程序 关于做好人感染H7N9禽流感病毒实验活动生物安全管理工作的通知 实验室检测程序（《人感染H7N9禽流感病例诊断程序》） 人感染H7N9禽流感疑似病例，先有各省的国家流感监测网络实验室进行标本的初步检测。 不具备检测条件的地区，在确保生物安全的条件下，可将标本送邻近具备相应条件和资格认证的国家流感监测网络实验室进行初步检测。 各省行政部门应该鼓励具备条件的实验室按照技术规范开展标本核酸检测工作，并可以作为诊断的实验室依据。 实验室检测流程1 当地流感监测网络实验室收到标本后24 小时内，立即对呼吸道标本开展甲、乙型流感病毒通用引物H5、H7亚型的检测。 若当地流感监测网络实验室检测结果为H5、H7核酸检测阳性时，应当于24小时内将其中2管呼吸道相关原始标本分别送省级疾控中心流感网络实验室和国家流感中心。 实验室检测流程2 若当地流感监测网络实验室检测结果为甲型流感和乙型流感通用引物均阴性时，应当立即将1管原始呼吸道标本送省级疾控中心。省级疾控中心收到标本后，应当立即对其中1管进行SARS 、新型冠状病毒等相关病原体的检测，另1管送国家流感中心。 当地流感监测网络实验室将采集的血清标本分别送省级疾控中心和国家流感中心开展病原体的抗体检测。 实验室检测流程3 当地流感监测网络实验室将采集的血清标本分别送省级疾控中心和国家流感中心开展病原体的抗体检测。 具备相应生物安全条件的网络实验室可开展病毒分离，并将分离的毒株按要求及时送国家流感中心。 特别说明 依据《人感染H7N9禽流感疫情防控方案（第一版）》 发生人感染H7N9禽流感疫情的省份，常规流感样病例监测哨点医院采集流感样病例标本数每周不低于15份，并将H7核酸检测纳入常规检测项目。 实验室检测试剂及方法 2010年及之前下发的H7引物不再用于检测 当前的新型H7N9病毒检测以中国CDC国家流感中心下发的引物和探针为准（Real-time PCR） 目前还没有其它快速诊断试剂和普通RT-PCR检测试剂 检测试剂 QuantiTect Probe RT-PCR Kit （Cat. 204443，Qiagen） SuperScr