浅析细胞工程作业.docVIP

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细胞工程作业

细胞工程作业 1.细胞死亡有几种形式?各有何特点? 有细胞坏死、细胞凋亡。 细胞坏死特点:膜通透性增加,细胞外形发生不规则变化,内质网扩张,核染色质不规则地位移,线粒体及核肿胀,溶酶体破坏,细胞膜破裂,胞浆外溢,从而诱发炎症反应。 细胞凋亡特点:细胞骨架扰乱、粘附力下降。细胞核和细胞质浓缩。180-200bp及其倍数的DNA ladder。胞质出芽,形成膜包围的凋亡小体。细胞内含物不外泄,无炎症反应。凋亡细胞可被周围细胞识别并吸收。 2.生物的生殖方式有几种? 无性生殖、有性生殖和无融合生殖。 3.细胞分化的基本特征是什么?细胞质和细胞核是如何影响细胞分化的? 特点:正常情况下,是稳定、不可逆的。一旦细胞受到某种刺激发生变化,开始向某一方向分化后,即使引起变化的刺激不再存在,分化仍能进行,并可通过不断继续下去。中的遗传物质是在分化进行基因的选择性表达 为的分化提供稳定的环境和能量 具体地说 遗传和中,调节着核和基因的作用。受精卵内的分布是均一的,受精卵经过,分成许多细胞,这些细胞中含有的细胞质内容是不同的(色素、粒和等),以后基因在不同的细胞质中作用下,表现出不同的效应,这就造成细胞和组织的分化 动物配子形成过程:增殖期、生长期、成熟期。 5.简述动植物胚胎发育过程。 植物胚胎发育:原胚阶段、胚的分化与成熟。动物胚胎发育:桑椹胚、囊胚→原肠胚(双胚层或三胚层)→器官原基→个体 6.何谓周期细胞、终端分化细胞和G0期细胞? 周期细胞:有的细胞未经分化,仍保留着分裂的能力,这种细胞就是周期细胞他们存在着分裂的周期终端分化细胞是不分裂细胞,即细胞永久的失去了分裂能力,而分化为具有一定形态结构及生理功能的组织细胞休眠细胞暂不分裂,但在适当的刺激下可重新进入称G0期细胞端粒是线状染色体末端的DNA。细胞分裂次数越多,其端粒磨损越多,寿命越短。a、细胞至少要在该培养基上经过连续三代测试,使细胞内原先贮存的生长因子已经用完,此后,若细胞还能生长,则说明培养基是适合细胞生长的。 b、原先是异源群体(heterogeneous population)的细胞系,经过在成分明确的培养基中适应选择后,细胞类型可能会变得较为单一。c、一般来说,转化程度较高的细胞更容易在成分明确的培养基中生长 4、动植物细胞培养基的组成和配制方法各是怎样的?有何异同点? 母液的配制和培养基的配制 1.培养基母液的配制 母液的配制是按药品的种类和性质分别配制,单独保存或几种混合4~5oC保存。 配制好的母液种类一般有:大量元素、微量元素、钙盐、铁盐、有机营养和单独保存的各种生长调节类物质。需加入过滤灭菌的药品,在高压灭菌后,培养基凝固前加入,并轻摇使混匀。 培养基终体积定容时,可以利用台秤通过重量进行培养基终体积的确定 5、植物体外培养所需要的生长调节类物质有哪些?它们的作用是什么? 组织培养中生长素的作用: 促进细胞伸长生长和细胞分裂,诱导愈伤组织形成,促进生根,诱导不定芽的分化(与细胞分裂素配合),诱导侧芽的萌发与生长,胚状体的产生等 细胞分裂素的作用:促进细胞分裂,诱导愈伤组织或器官分化不定芽,抑制顶端优势而促进茎的增值,抑制离体组织或器官衰老。赤霉素类:促进诱导形成的不定芽正常发育成小植株。脱落酸:抑制蛋白质合成,抵消和抑制生长素、细胞分裂素和赤霉素发挥作用,诱导休眠,促进衰老和脱落,抑制气孔开放,减少蒸腾作用,对一些培养物芽的形成有促进作用。乙烯:促熟作用,促进脱落和衰老,促进胶、漆、松脂等次生物质的排泌,促进菠萝开花,增加黄瓜等雌花数量。 6、何谓培养基、生长培养基、维持培养基、合成培养基、天然培养基、无血清培养基? 培养基是离体培养组织或细胞赖以生存的营养基质,是为离体培养材料提供的近似生物体内生存的营养环境。 生长培养基是指用来培养细胞使其快速生长增值的培养基。 维持培养基是指只能用来维持培养细胞的存活,但不能促使细胞生长和增值的培养基。 合成培养基是指按照体内细胞所需营养的种类和数量配成的成分明确的培养基。 天然培养基包括各种动物的体液,组织提取液,水解乳蛋白 无血清培养基是指培养基中没有血清,而是各种因子来代替血清。 1、试述动物细胞原代和传代培养方法。 组织块培养法 消化培养法 2、如果你在动物细胞原代培养中,遇到细胞不迁移或迁移生长缓慢的情况,你将采取哪些措施来解决? 3、试述动物细胞固定化培养的原理和方法。 4、你认为胚胎干细胞培养与其它细胞培养相比,难点在哪里? 5、体外培养动物细胞的形状主要有哪几种类型?你如何理解细胞形状的可塑性? 体外培养的动物细胞,按照其生长方式可以分为: 1.贴壁生长型细胞(贴壁型细胞) 2.悬浮生长型细胞(悬浮型细胞 按照贴壁型细胞的体外培养时的形态,主要分为四大类: 成纤维细胞型细胞 上皮型细胞 游走

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