基因工程、克隆技术..pptVIP

听课心得 审题关键：“工具酶”、“植物细胞”、“原理”、“染色体上”、“预期” 命题来源：基因工程和蛋白质工程。 思路分析：(1)转基因植物的培育过程中，基因工程的工具酶是限制制性核酸内切酶的DNA连接酶，目的基因只有含有启动子，才能被RNA聚合酶识别并与之结合进行转录。(2)接受目的基因的受体细胞若 植物体细胞，可采用植物组织培养技术获得转基因植物。(3)通过对比转基因植物是否普通的非转基因植物的出油率高。(4)蛋白质工程设计流程是：预期蛋白质的功能→设计预期的蛋白质结构→推测出应有的氨基酸序列→找到相应的脱氧核苷酸序列。 考点2　细胞工程相关知识整合 1．细胞工程的几个过程流程图比较 2.植物组织培养与动物细胞培养的比较 植物组织培养 动物细胞培养 原理 细胞的全能性 细胞增殖 培养基的物理性质 固体 液体(合成培养基) 培养基的成分 水、无机盐、维生素、蔗糖、氨基酸、琼脂等 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等 结果 新的植株或组织 新的细胞系或细胞株 应用 ①微型繁殖 ②作物脱毒 ③生产人工种子 ④单倍体育种 ⑤突变体的利用 ⑥细胞产物的工厂化生产 ①蛋白质生物制品的生产 ②皮肤移植材料的培育 ③检测有毒物质 ④生理、病理、药理学研究 条件 均需无毒环境无菌操作，适宜的营养、温度、pH、O2等 3.植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较 细胞工程 植物体细胞杂交 动物细胞融合 实质内容 改变遗传物质、产生新的性状，获得细胞产品(使后代具有双亲的特性) 理论基础 植物细胞具有全能性 细胞增殖 诱导手段 物理法：离心、振动、电激 化学法：聚乙二醇 物理法：离心、振动、电激 化学法：聚乙二醇 生物法：灭活的病毒 诱导过程 去细胞壁 (纤维素酶、果胶酶) ↓ 原生质体融合 (获得杂种原生质体) ↓ 植物细胞培养 (获得植株) 获得分离的单个动物细胞 (胰蛋白酶处理) ↓ 诱导融合 ↓ 动物细胞培养 (细胞产品) 应用 白菜-甘蓝等杂种植物 单克隆抗体的制备(杂交瘤细胞) 【例1】 野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗 寒能力，但块茎不能食用。俄、德、芬兰专家共同做实验研究， 用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交，培育出了生活能力强 的杂交系马铃薯。据图分析回答问题： (1)①过程植物细胞原生质体的分离需经过酶解，其中“酶解”所用的酶应该包括________________。 (2)②过程可用聚乙二醇(PEG)，其目的是______________________。 (3)请用文字和箭头表示出④⑤技术过程的实验流程：_____________________________________________________________。 由此过程可以看出植物细胞有形成完整个体的可能性，这是 __________________的表现。 (4)在培养基上培养一段时间后，原生质体会再生出细胞壁。可以取样，通过__________________________实验来鉴别细胞壁是否已经再生。 (5)请说明运用植物体细胞杂交法的最大好处：_____________________________________________________________。 纤维素酶、果胶酶 诱导原生质体融合 融合细胞 愈伤组织 幼苗 植物细胞具有全能性 植物细胞的质壁分离与复原 可以克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍 听课心得 审题关键：“酶”、“聚乙二醇”、“文字和箭头”、“细胞壁” 命题来源：植物体细胞杂交。 思路分析：(1)若去掉细胞壁而获得原生质体，需用纤维素酶和果胶酶来处理。(2)用聚乙二醇处理原生质体，可以诱导原生质体融合。(3)④⑤分别为脱分化和再分化过程，能够形成一个完整植株，体现出植物细胞的全能性。(4)可以通过质壁分离与复原实验来鉴别原生质体是否再生出细胞壁。(5)植物体细胞杂交的最大好处在于可以克服远缘杂交不亲和的障碍。 【例2】 (潍坊质检)人CD20单克隆抗体是治疗一些恶性肿瘤的特效药 物，目前主要是通过培养哺乳动物细胞的方式生产。我国科学家已经 培育出世界上第一头转入了CD20抗体基因的转基因牛，可以从它产 的牛奶中直接提取CD20抗体。这项技术成熟后，有望使这一特效药 的生产成本降至现在的1/10。请回答： (1)单克隆抗体的制备过程需先将____________________和 ______________融合，这一过程的诱导方法与植物体细胞杂交不同的 是_________________。