第5节 色谱峰展宽得柱外因素.pptVIP

第二章 色谱法的基本术语及理论 主要内容 主要内容 柱外峰展宽又称柱外效应。实际上，在色谱系统中，除了柱内峰展宽外，在色谱柱外也存在峰展宽的因素。引起峰展宽的柱外因素为进样器、检测器和各种连接管中的死体积。 因此，色谱峰展宽的总方差等于柱内、柱外及其独立因素的方差和，即 σ2总 = σ2柱内 + σ2柱外 + σ2其他。 降低柱外效应的方法 若管内径减小，其长度可增加；内径增大，则长度要缩短。0.25mm内径连接管应保持在100mm左右或更短。若采用内径为0.5mm连接管，则长度应在10mm以下，因而在进样器和检测器之间不使用0.5mm的连接管。但连接管内径减小，管内压力降较大，会使泵压上升。 降低柱外效应的方法 一般检测池内色谱峰展宽小于总的色谱峰展宽的10%时，则要求检测池体积小于14μl，一般为5 ~ 8μl。 降低柱外效应的方法 进样有时会是峰展宽的主要原因，这取决于进样体积和进样方式。进样体积越大，柱外效应越大 进样方式一般有阀进样与注射进样两种，阀进样允许进样体积大，注射进样允许进样体积小。 另外，进样体积还与溶质 k 值有关，溶质 k 值越大，允许进样的体积越大。 对于气相而言，由于色谱柱体积占色谱系统总体积的比例很大，柱外效应比较小。而高效液相色谱由于色谱柱体积较小，且溶质在液相中扩散系数很低，柱外效应对于色谱峰展宽成为不可忽略的因素，使用细内径色谱柱，考虑柱外效应尤为重要。 主要内容 主要内容 中国药科大学色谱分析课程 丁 黎 色谱分析 丁黎 中国药科大学色谱分析课程 * 第一节 色谱分离与保留作用 第二节 有关色谱保留的基本术语及参数 第三节 塔板理论 第四节 速率理论 第五节 色谱峰展宽的柱外因素 第六节 分离度及影响因素 第七节 系统适应性试验 第八节 测定法 第九节 色谱吸附或分配等温线 第五节 色谱峰展宽的柱外因素 尽量减小连接管线的长度，并采用细内径的管线为连接线 采用死体积小的检测器 采用合适的进样方式和技术 第一节 色谱分离与保留作用 第二节 有关色谱保留的基本术语及参数 第三节 塔板理论 第四节 速率理论 第五节 色谱峰展宽的柱外因素 第六节 分离度及影响因素 第七节 系统适应性试验 第八节 测定法 第九节 色谱吸附或分配等温线 * * 中国药科大学色谱分析课程 丁 黎