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BD BBL Crystal AutoReader微生物鉴定仪简介与使用 BD诊断 栾晓辉 alex_luan@BBL Crystal微生物鉴定系统 BBL CrystalTM是以荧光、显色技术相结合的小型细菌鉴定系统 鉴定菌库：500多种 革兰氏阳性菌 厌氧菌 肠杆菌/非发酵菌 奈瑟/嗜血菌等 最快4小时内得到鉴定结果 操作简便，结果判读准确 多种配置，灵活选用 鉴定试剂种类 Gram Positive 革兰氏阳性菌 Rapid Gram Positive 快速革兰氏阳性菌 Neisseria/Haemophilus 奈瑟/嗜血菌 Anaerobe 厌氧菌 Enteric/Non Fermenter 肠/非发酵 部分菌库示例 试剂与耗材 试剂中包括试剂板、盛液盒、接种液、比色卡等 试剂板，独立包装，2-8℃保存 盛液盒，2-8℃或室温下，无尘环境保存 接种液，2-8℃或室温下，无尘环境保存 一个货号订购即可获得实验中所需的全部组分 鉴定板条上可同时进行29-30种细菌鉴定反应，通过灵敏度高、准确率高的荧光与显色反应相结合，判读细菌种类 部分细菌鉴定前需进行吲哚、氧化酶、触酶等预反应 仪器 Crystal AutoReader由阅读仪主机、电脑、MIND软件、定标板、比浊仪组成 仪器内置显色/荧光阅读系统、信号传输装置 每次只需很短时间即可扫描并自动鉴定一份样本 操作流程（一） 待检菌株须为纯培养，单菌落，培养时间不超过24小时（对某些生长缓慢的细菌可延长至48小时左右） 根据革兰氏染色情况选择相应的鉴定板条 接种至接种肉汤管 用比浊仪将菌悬液浊度调至所需范围内 E/NF（肠/非发酵） 0.5 McFarland GP （革兰氏阳性） 0.5 McFarland N/H（奈瑟氏/嗜血） 3.0McFarland ANR（厌氧） 4.0-5.0 McFarland RGP（快速革兰氏阳性） 2.0 McFarland 操作流程（二) 菌液上样的技术要点 将接种好的菌液缓慢倒入盛液盒的顶端（空间较大的一端） 小幅度左右反复倾斜盛液盒，使菌液沿轨道流淌，并均匀铺满各孔 菌液流经全部轨道后，将剩余液体流回顶端（将被试剂板对应位置上的海绵吸走） 将试剂板扣入盛液盒内。先从一端卡入，缓慢地将另一端也卡紧 标记样本号 孵育时，标签向下 独特的设计，带来操作的简便 一步法接种菌悬液 无需添加试剂 无需加样器或滴管 无需石蜡油覆盖 不易产生气泡 孵育过程 35-37℃ 厌氧菌亦无需CO2培养箱（试剂特定组分的效果） 40-60%湿度 孵育时间： Gram Positive （革兰氏阳性） 18-24小时（过夜） Rapid Gram Positive （快速革兰氏阳性） 4小时 N/H （奈瑟氏/嗜血） 4小时 Anaerobe （厌氧） 4小时 Enteric/NF （肠/非发酵） 18-24小时（过夜） 注意事项 试剂板打开包装后，请在1小时内使用 接种完成后，请尽快开始孵育 孵育时间不亦超过推荐时间过长 孵育结束后，应尽快读取鉴定结果。延迟过多，结果可信度较低 自动判读流程 打开程序软件 选择检测板种类 添加手工实验结果（氧化酶、触酶、吲哚） 扫描检测板（板条的标签应向外、向下） 进行结果分析与鉴定 根据软件建议，决定是否需要进行补充实验 手工判读流程 在日光灯下判读显色反应 在UV下判读荧光反应（E/NF板条没有荧光反应） 参照比色卡，记录反应结果 利用Crystal MIND软件进行菌种判读 选择检测板种类 添加手工实验结果 进行结果分析与鉴定 根据软件建议，决定是否需要进行补充实验 比色卡示例 根据比色卡进行的手工记录 软件的使用 点击桌面上“微生物细鉴定系统”软件图标，启动程序 输入用户名BBL Crystal，密码bbl 出现初始界面 初始界面 数据输入界面 数据输入界面 菌种鉴定结果 注意事项 仪器开机后需预热10分钟以上 每2周请使用随机附送的定标板对仪器进行校准 鉴定板条卡在仪器内时，请勿尝试用力打开仪器门。请关闭仪器电源后，打开门，取出板条 有任何问题，可咨询BD公司 BBL Crystal产品特点小结 谢谢！ 2010.12.17 南京 * * * 5 种黄杆菌，8 种假单胞菌，9 种弧菌，5 种沙门氏菌，3 种志贺氏菌，E. Coli O157 O111，鼠疫耶尔森氏菌，还包括：气单胞菌属、邻单胞菌属、黄杆菌属、小肠 结肠炎耶尔森氏菌