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第二章 微生物菌种的制备原理与技术
第二章 微生物菌种制备原理与技术;;微生物的类群;真菌;微生物的特点:
1.微生物的比表面积非常大。
迅速摄取所需各种营养物质,维持极高的生长繁殖速度和很高的生物合成活动
2.代谢反应具有多样性。
次级代谢为人类提供无穷无尽的次级代谢产物
3.容易适应多种环境。
可以把菌种从自然界转种到实验室或工业生产,进行人工培养,在廉价的碳源、氮源条件下合成若干中有价值的代谢产物
;工业微生物发酵的重要经济产品:
1. 微生物细胞
2. 微生物生命活动过程中产生的大分子化合物:酶、多糖、核酸、蛋白质等
3. 微生物代谢的转化产物:低级醇、有机酸
4. 微生物产生的初级和次级代谢产物: 氨基酸、核苷酸、抗生素、生物碱、毒素、色素等;第一节 发酵工业微生物菌种;1、 细菌
单细胞原核生物,自然界中分布最广、数量最多
繁殖方式:
无性二等??分裂法
产品:
氨基酸、核苷酸、多糖、
酶、有机酸
工业常用
枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、
乳酸乳杆菌、谷氨酸棒状杆菌;;菌落
定义:单个或者少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,会形成一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体,也称群落。
特征:大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等。
功能:每种细菌在一定条件下所形成的菌落,可以作为菌种鉴定的重要依据。
;几种菌落;2、放线菌
概述:具有菌丝,主要以孢子繁殖,革兰氏染色 阳性的一类原核微生物。
分布:含水量较低、有机质丰富和呈碱性土壤中。
结构:营养菌丝、气生菌丝、孢子丝。
繁殖:无性孢子,菌丝片段(液体)、孢子囊;;3、酵母
概述:腐生类真核生物,单细胞,卵圆形或圆柱形
分布:含糖丰富而偏酸环境
繁殖方式:无性生殖和有性生殖
菌落:多为乳白色,少数黄色、红色、黑色
产品:酒精、有机酸、单细胞蛋白
工业常用:酿酒酵母、光滑假丝酵母、
热带假丝酵母;4、霉菌
概述:丝状真菌
分布:土壤、水域、空气及动植物体外
繁殖方式:无性孢子和有性孢子
生长方式:菌丝末端的生长和顶端分支,彼此交错呈网状。
菌落:菌丝粗长、疏松、绒毛状、大
工业用:青霉、曲霉、毛霉、木霉等
;红曲霉;发酵产品是高浓度、高转化率和高产率的,菌株应为分泌型;
菌株能利用常用的碳源,并可连续培养
菌株是非致病的,不产生内毒素;
发酵所产生的热量和需氧量低,发酵温度适当;
代谢控制容易进行;
能进行适当的重组DNA,并且重组稳定。
抗噬菌体和杂菌污染的能力强;四、菌种的制备原理与方法;;从自然界分离筛选微生物的方法;五、适应性进化;六、菌种的保藏;;;;菌种生理状态的改变;;2.菌种的复壮;3.工业微生物菌种的保藏;3.工业微生物菌种的保藏;;;;;;菌种保藏注意事项
菌种保藏前所处状态(休眠体,如孢子芽孢)。
菌种保藏所用的基质
操作过程对细胞结构的损害
工程菌的保藏
常用宿主:大肠杆菌和毕赤酵母
常用方法:甘油(15%)和菌悬液混匀后-80℃冰箱保存 ;第二节 发酵微生物生理学;;;1.次级代谢与初级代谢的关系
概念
初级代谢:在微生物的新陈代谢中,一般将微生物从外界吸收各种营养物质,通过分解代谢和合成代谢,生成维持生命活动的物质和能量的过程。
次级代谢:是相对与初级代谢而提出的一个概念,指微生物在一定的生长时期,以初级代谢产物为前体,合成一些对微生物的生命活动没有明确功能的物质的过程。;
代谢产物
初级代谢产物:单糖或单糖衍生物、核苷酸、维生素、氨基酸、脂肪酸等,还有由它们组成的各种大分子聚合物,如蛋白质、核酸、多糖、脂质等生命必需物质。
次级代谢产物:由初级代谢产物和中间体形成,分子结构比较复杂,根据其作用可分为抗生素、激素、生物碱、毒素等,通常分泌到胞外。
分叉中间体:菌体代谢过程中产生的某些中间产物,即可用于合成初级代谢产物,又可用于合成次级代谢产物。;;存在范围不同
初级代谢的代谢系统、途径、产物在各类生物中都基本相同,它是普遍存在的基本代谢类型。
次级代谢只存在于某些生物中,具有种属特异性。
功能不同
初级代谢:能使营养物质转化为结构物质、具生理活性物质或为生长提供能量,是机体生存必不可少的物质,在这些物质的合成过程的任何环节发生障碍,或者导致生长停止或死亡,是最基本的代谢。
次级代谢:对菌体自身的生命活动无明确功能,不参与细胞结构组成,也不是酶活性必需的,也不是机体生长和繁殖所必需的物质。;合成时期不同
初级代谢:自始自终存在与菌体中,同菌体的生长过程呈平行关系,只有微生物大量生长,才能积累大量初级代谢产物。
次级代谢:是菌体生长至对数生长末期或稳定期产生的,它与机体的生长不呈平行关系。
;;1)代谢途经上:分叉中间体
2)酶学关系上:催化次级代谢途径中各步反应的酶
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