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松茸多糖两种测定方法比较探究.doc

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松茸多糖两种测定方法比较探究

松茸多糖两种测定方法比较探究  作者:刘倩,何法林,江春花,白淑芬,王慧芳,喇万英 【摘要】   目的选择一种准确、稳定、简便的松茸多糖含量测定的方法。方法对硫酸-蒽酮法和苯酚-硫酸法测定松茸子实体多糖的含量进行比较。结果硫酸-蒽酮法和苯酚-硫酸法分别在1.2~12 mg·L-1(r=0.999 3)和1.5~15 mg·L-1(r=0.999 1)范围内呈线性关系;精密度实验RSD分别为0.13%和0.31%;硫酸-蒽酮法在3h内稳定,苯酚-硫酸法在6h内稳定;含量测定结果分别为4.28%和4.95%。结论苯酚-硫酸法测定松茸多糖含量显色灵敏,颜色稳定,操作简便,可作为测定松茸多糖含量测定的方法。 【关键词】 松茸; 多糖含量; 蒽酮-硫酸法; 苯酚-硫酸法   Abstract:ObjectiveTo select a more accurate, stable and convenient method for detemination of Polysaccharide content in Tricholoma matsutake Sing. MethodsPolysaccharide content in Tricholoma matsutake Sing was determined by two methods: athranone-sulfuric acid method and phenol-suifuric acid method. ResultsThe standard curve of athranone-sulfuric acid method and phenol-suifuric acid method was respectively linear in the ranges of 1.2~12mg·L-1(r=0.999 3) and 1.5~15mg·L-1(r=0.999 1) , athranone-sulfuric acid method was stable within 3 h, phenol-suifuric acid method. was stable within 6 h; the content was 4.28% and 4.95% respectively. ConclusionPhenol-suifuric acid method is sensitive,stable and convenient and can be used for determination of polysaccharide content in Tricholoma matsutake Sing.   Key words:Tricholoma matsutake Sing; Polysaccharide content; Anthranone-sulfuric acid method; Phenol-suifuric acid method 松茸Tricholoma matsutake Sing.是赤松、台湾松等树木的活体共生菌,又称松茸、松蕈、松蘑、鸡丝菌,属担子菌亚门、层菌纲、伞菌目、口蘑科、口蘑属[1]。子实体味道鲜美,有很高的营养价值和特殊的药用效果,被誉为“蘑菇之王”[2]。现代研究表明,松茸有治疗糖尿病、抗癌、镇咳、祛痰、平喘等作用[3]。松茸多糖含量的测定,有采用苯酚-硫酸法[4],有采用硫酸-蒽酮法[5]。本文对松茸多糖的两种测定方法进行了比较研究,以选定一种方便快捷的适合松茸多糖含量测定的方法。   1 仪器   1.1 仪器722分光光度计;水浴锅,电子天平,干燥箱、循环水真空泵。   1.2 试药葡萄糖(中国药品生物制品检定所);95%乙醇、浓硫酸、蒽酮、苯酚均为分析纯,水为双蒸水。松茸购自吉林省博苑长白山特产科技有限公司。   2 方法与结果   2.1 对照品溶液的配制精密称取经105℃干燥至恒重的无水葡萄糖对照品10 mg,置100 ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,配制成每毫升中含无水葡萄糖0.1 mg的对照品溶液。   2.2 样品溶液的制备精密称取60℃干燥至恒重的松茸细粉0.5g,置圆底烧瓶中,加80%乙醇150 ml,加热回流1 h,趁热滤过,残渣用80%乙醇洗涤3次,将残渣及滤纸置烧瓶中,加水150 ml,加热回流1 h,趁热滤过,烧瓶及残渣用热水洗涤3次,合并滤液与洗液,转移至250 ml量瓶中,加水至刻度,摇匀。   2.3 硫酸-蒽酮法测定松茸多糖的含量   2.3.1 标准曲线的制备精密量取对照品溶液0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1 ml,分别置10 ml具塞刻度试管中,各加水至2.0 ml,摇匀,在冰水浴中缓慢滴加0

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