肿节风挥发油对荷瘤小鼠化疗增效减毒作用.docVIP

肿节风挥发油对荷瘤小鼠化疗增效减毒作用 　 作者：吕圭源 陈素红 张园 陈雁虹 吕秀娟 华波 颜美秋 【摘要】 ［目的］研究肿节风挥发油（SGE）对环磷酰胺（CTX）治疗H22、S180小鼠的增效和减毒作用。［方法］建立小鼠体内移植性肉瘤、肝癌模型，通过两种给药途径，观察肿节风挥发油与环磷酰胺联合用药对荷瘤小鼠抑瘤率的影响；观察SGE拮抗CTX引起血小板、白细胞及血红蛋白下降。［结果］肿节风挥发油与CTX合用时，对肝癌H22、肉瘤S180两种肿瘤均有不同程度的抑瘤增效作用。CTX（10mg/kg或15mg/kg）分别联用iv.SGE（36.6mg/kg），对小鼠H22、S180的抑瘤率均高于相应剂量的单用CTX（Plt;0.05）；CTX（20mg/kg）联用ig.SGE（73.2mg/kg），对H22的抑瘤率高于单用CTX（Plt;0.05）。肿节风挥发油能明显拮抗CTX引起的血小板、白细胞下降（Plt;0.05～0.01）。［结论］肿节风挥发油能增强CTX的抗肿瘤作用，同时减轻CTX的毒性。 【关键词】 肿节风挥发油 环磷酰胺 增效 减毒 肿节风是金粟兰科草珊瑚属植物草珊瑚Sarcandra glabra (Thunb.) Nakai的干燥全草［1］，又名草珊瑚、九节茶、接骨木。肿节风味苦、辛、性平，归心、肝经。辛能行散，苦凉泄热，即除外侵之风湿，有解内蕴之热毒。肿节风注射液具有抗肿瘤、抗菌消炎、抗病毒作用，适用于肌肉注射，其生产工艺以水煎煮提取，酒精沉淀去杂质。临床前需要稀释，有可能造成二次污染。为寻找新的抗癌增效、减毒剂，本课题组提取得到肿节风挥发油，通过H22、S180两种荷瘤模型，采用两种给药途径，观察与CTX联合应用对肿瘤的影响。 　　1 材料 　　1.1 药物 肿节风药材，浙江国镜药业有限公司；肿节风挥发油（SGE），取肿节风药材经水蒸气蒸馏法提取挥发油，临用前配制成剂量为1.83mg/ml、2.75mg/ml、3.66mg/ml；注射用环磷酰胺：江苏恒瑞医药股份有限公司，批号氯化钠注射液：国营张家港制药厂，批 　　1.2 瘤株 小鼠肉瘤S180、小鼠肝癌H22，浙江中医药大学生命科学院提供。 　　1.3 仪器 Heraeus Biofuge冷冻离心机，德国Heraeus；Power Wave340酶标仪，美国BioTek。 　　1.4 动物 昆明种小鼠，体重18～22g，雌雄各半，浙江中医药大学动物中心提供，动物许可证号为SCXK（沪）2003-0003。 　　2. 方法 　　2.1 两种给药途径对CTX的增效作用实验［2］ 动物分组：昆明种小鼠，体重18～22g，随机分成7组。①SGE iv：模型对照组（NS）、两组单用CTX1、2组（10mg/kg、15mg/kg），另设CTX+SGE1、2组（10mg/kg、15mg/kg）分别加用SGE（18.3mg/kg、36.6mg/kg），每组12只小鼠。模型对照组iv生理盐水，CTX组ip.，SGE给药组iv.，0.1ml/10g，连续12天。②SGE ig：模型对照组（NS）、两组单用CTX组（10mg/kg、20mg/kg），另设CTX+SGE3、4组（10mg/kg、20mg/kg）分别加用SGE（18.3mg/kg、36.6mg/kg），每组12只小鼠。模型对照组ig生理盐水，CTX组ip.，0.1ml/10g，SGE给药组ig.，0.2ml/10g，连续12d。取昆明种小鼠S180/H22细胞腹腔内接种8d的种鼠，无菌条件下吸出1～2ml牛奶状、较粘稠的腹水，先用0.4%苔盼蓝染色，计活细胞率gt;90%，血球计数板计数癌细胞数，以DHanks稀释调整细胞浓度为1×107个/ml，每只小鼠0.1ml右前肢腋窝皮下接种。于末次给药后的第2天脱处死小鼠，完整剥取瘤块，称重，比较单用CTX治疗组与联用SGE组间抑瘤率的差异，观察SGE的增效作用。 　　抑瘤率（%）=（对照组平均瘤重－给药组平均瘤重）/对照组平均瘤重×100%。 　　2.2 SGE对CTX致荷瘤小鼠血细胞下降的影响［3］ 取昆明种小鼠60只，随机分成5组，即正常对照组，模型对照组（CTX），SGE剂量组（18.3mg/kg、27.5mg/kg、36.6mg/kg），每组12只。除正常对照组外，各组动物均ip.60mg/kgCTX，1次/d，连续7d。SGE组按照剂量iv.，0.1ml/10g，于停药后24h自小鼠眼眶静脉取血，EDTAK2抗凝，测白细胞数量、血小板数量、血红蛋白浓度。 　　2.3 统计学处理 数据采用t检验，以x±s表示。 　　3 结果 　　3.1 SGE iv给药与CTX合用对S180荷瘤小鼠增效的影响 表1显示，与模型