第08章 分光光度法测电离常数.pdfVIP

分光光度法测溴酚蓝的电离平衡常数 分光光度法测溴酚蓝的电离平衡常数 Lulu PB09207xxx 中国科学技术大学生命科学学院 【摘 要】 每种物质都有对于通过它的单色光的吸收具有选择性的特性。分光 光度法是基于这种物质对光的选择吸收性而建立的，这一特性不仅 是研究物质内部结构的基础，也是定量分析的基础。因此可以利用 不同波长对某多组分溶液的组分的不同吸收来确定体系中组分的 含量，本实验利用其来求算溴酚蓝（BPB）的电离平衡常数。 【关键词】 溴酚蓝、贝尔-朗比定律、消光度、电离平衡常数、分光光度计 1. 引言 电离平衡常数是理解化学现象如反应速率、生物活性、生物吸收、代谢等的 一个重要参数。 1852 年，比尔(Beer)参考了布给尔(Bouguer)1729 年和朗伯(Lambert)在 1760 年所发表的文章，提出了分光光度的基本定律，即液层厚度相等时，颜色 的强度与呈色溶液的浓度成比例，从而奠定了分光光度法的理论基础，这就是著 名的贝尔-朗比定律。 溴酚蓝（BPB）是一种酸碱指示剂，本身带有颜色且在有机溶剂里电离度很 小，所以一般的化学分析法或其他物理化学方法很难测定其电离平衡常数。因此 我们必须采取其他方法来进行测定。BPB 在有机溶剂中存在着以下的电离平衡： K a   HA H  A 溶液中含有显色物质HA 和 引起的，HA 和 有自己的特定吸收波长，而且不 会产生交叉，因此可以利用分光光度法测定两种不同物质的组分，从而确定BPB 的电离平衡常数。 2. 实验记录 2.1 仪器与试剂 仪器：超级恒温水浴501 型 上海实验仪器厂有限公司 722 光栅分光光度计一台 上海第三分析仪器厂制造 精密pH 计一台(pHS-3c 型) 上海雷磁仪器厂 100ml 容量瓶 7 个 10ml 移液管 2 支 50ml 移液管 1 支 100ml 移液管 1 支 滴管 1 支 1 / 6 分光光度法测溴酚蓝的电离平衡常数 试剂： 0.1483mol/L 的HCL 溶液 1mol/L 的HCL 溶液 0.1 mol/L 的NaOH 溶液 0.2 mol/L 的NaOH 溶液 5 5 ×10 mol/L 的溴酚蓝溶液 0.1mol/L 的邻苯二甲酸氢钾溶液 2.2 实验过程 (1)打开超级恒温水浴使之恒温在 25℃，打开分光光度计，预热仪器， 同时掀开样品室盖。 (2)确定溶液的最大吸收波长。 a) 用20mL 移液管准确移取5 ×10-5 mol ·dm-3 的B.P.B 溶液20mL， 置于一个洗干净的100mL 的容量瓶中，并用50ml 的移液管准确加 入50mL0.1mol ·dm-3 的邻苯二甲酸氢钾缓冲溶液，加H2O 稀释到 刻度，得1.0×10-5 mol ·dm-3 的B.P.B 溶液。 b) 取１cm