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HSP27及HSP70mRNA在大肠癌中表达临床意义 　 作者：杨淼 张晓丽 薄爱华 马利红 【摘要】 目的：探讨HSP27和HSP70mRNA在大肠癌中表达的临床意义。方法：取大肠癌标本77例，采用免疫组织化学方法检测HSP27的表达状况，从中选取36例手术标本，采用核酸原位杂交技术（ISH）检测HSP70mRNA的表达。结果：HSP27和HSP70mRNA在大肠癌中的阳性率分别为40.3%和66.9%，HSP27和HSP70mRNA均与大肠癌的分化程度相关，与发生部位、浸润深度及淋巴结转移无明显相关性。结论：检测HSP27和HSP70mRNA可作为大肠癌患者预后的一个重要指标。 【关键词】 肠肿瘤 HSP70热休克蛋白质类 热休克蛋白质类 免疫组织化学 【ABSTRACT】 Objective: To investigate the clinical significance of HSP27 and HSP70mRNA expression in large intestine cancer. Methods: The expression of HSP27 was examined by immunochemistry in 77 cases with large intestine cancer. The expression of HSP70mRNA in 36 cases with large intestine cancer was examined by in situ hybridization. Results: The positive rates of HSP27, HSP70 mRNA in large intestine cancer were 40.3% and 66.7% respectively. They had relationship with tumor differentiation degree, but had nothing to do with the region ，invasion depth and lymph node metastasis. Conclusion: HSP27 and HSP70mRNA can serve as markers for prognosis judgment for large intestine cancer. 【KEY WORDS】 Intestinal Neoplasms,HSP70 HeatShock Proteins,HeatShock Proteins,Immunochemistry 热休克蛋白是细胞应激原特别是环境高温诱导下所生成的一组蛋白质，具有多种生物学功能，它与肿瘤的发生、发展及肿瘤耐药性的产生等都有密切关系［1～3］。我们采用免疫组织化学及核酸原位杂交两种技术方法，检测HSP27和HSP70mRNA在大肠癌中的表达，为大肠癌的发病机制提供分子生物学依据。 1 材料和方法 1.1 一般资料 收集河北北方学院附属第一医院2002～2004年肠癌标本77例，其中肠道内窥镜活检确诊肠癌标本18例；男性56例，女性21例；年龄分布35～74岁，平均年龄58.12岁。从中选取手术标本36例，男性21例，女性15例;年龄分布38～65岁，平均年龄57.51岁。标本均经10%福尔马林液固定，石蜡包埋，切片厚度7μm，常规HE染色，另贴于表面涂有多聚赖氨酸的载玻片上，37℃温箱保存。 1.2 试剂 HSP27单克隆抗体及DNA显色剂购自北京中山生物公司，HSP70寡核苷酸探针对人的HSP70靶基因的mRNA序列为（1）5′—GCCGC AAGTT CGGCG ACCCG GTGGT GCAGT CGGAC—3′（2）5′—ACAGG CTGGT GAACC ACTTC GTGGA GGAGT TCAAG—3′，此探针及ISH试剂盒均购自武汉博士德生物工程公司。 1.3 方法 采用免疫组织化学SABC法，切片经常规脱蜡、水化后，用3%过氧化氢去除内源性酶，微波炉抗原修复，滴加第一抗体单克隆抗体HSP27，DAB显色苏木素复染，光镜观察。原位杂交操作程序严格按照试剂盒规定，其中消化时间为5min，38℃水浴，预杂交3h（38℃），杂交时间约16h（38℃），DAB显色。 1.4 统计学处理 采用χ2检验，P＜0.05为有显著性差异。 2 结果 HSP27和HSP70mRNA阳性物质位于细胞质内，呈棕黄色，核不着色。HSP27在大肠癌中的阳性率为40.3%，其在高分化腺癌和中～低分化腺癌中阳性率分别为48.1%和21.7%，二者比较有显著性差异（P＜0.05)，但与浸润深度、发生部位及有无淋巴结转移无明