半滑舌鳎转化生长因子TGF-β1和TGF-β3基因的克隆及受哈维氏弧菌.PDF

Online system: 农 业 生 物 技 术 学 报 Journal of Agricultural Biotechnology 2016, 24(6): 889~898 DOI: 10.3969/j.issn. 1674-7968.2016.06.012 半滑舌鳎转化生长因子TGF-β1和TGF-β3基因的克隆及受哈维氏弧菌 感染后表达分析 1，2 ，3 1，3* 4 1，3 1，3 1，2 ，3 李雪 陈松林 杨长庚 邵长伟 李仰真 位战飞 1 中国水产科学研究院黄海水产研究所/农业部海洋渔业可持续发展重点开放实验室，青岛266071 ；2 上海海洋大学水产与生命学院，上 海201306 ；3 青岛海洋科学与技术国家实验室/海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室，青岛266237 ；4 中国水产科学研究院长江水产 研究所/农业部淡水生物多样性保护与利用重点开放实验室，武汉430223 *通讯作者，chensl@ 摘 要 转化生长因子β(transforming growth factor β, TGF-β)是一类具有多种功能的蛋白超家族，在细 胞免疫、细胞增殖分化和组织损伤的修复中起着关键性作用。本研究从半滑舌鳎(Cynoglossussemilaevis) 肝脏中克隆获得了TGF-β1和TGF-β3基因。推导的TGF-β1和TGF-β3 氨基酸序列均含有多个N 糖基化 位点和一个TGF-β家族标签。系统进化树分析显示，半滑舌鳎TGF-β1和TGF-β3分别与鱼类的TGF-β1和 TGF-β3亲缘关系最为密切。qRT-PCR 结果表明，半滑舌鳎TGF-β1和TGF-β3基因在健康鱼的多个组织中 均有表达，二者在皮肤中表达量最高，在肌肉中表达量最低。经哈维氏弧菌(Vibrioharveyi)感染后，TGF-β 1在肝脏、脾脏和肾脏中呈现先上升后下降的表达趋势，在感染48 h 后的肝脏中表达量达到最大值，是对 照组的3.17倍；TGF-β3在脾脏、肾脏和鳃中也呈现先上升后下降的表达趋势，在感染24 h 后的鳃中表达 量达到最大值，是对照组的4.71 倍。以上结果提示，TGF-β1和TGF-β3可能在半滑舌鳎抵御细菌感染的 免疫中发挥了重要作用，本研究为证明二者参与机体免疫调节提供了有力证据，为半滑舌鳎分子免疫研 究提供了理论依据。 关键词 半滑舌鳎，转化生长因子β(TGF-β) ，TGF-β1，TGF-β3，表达分析 中图分类号 S917 文献标识码 A Molecular Cloning and Expression Analysis of Transforming Growth Factor TGF-β1 and TGF- β3 in Half- smooth Tongue Sole (Cynoglossus semilaevis) Following Stimulation with Vibrioharveyi LI Xue1, 2, 3 CHEN Song-Lin1, 3* YANG Chang-Geng4 SHAO Chang-Wei1, 3 LI Yang-Zhen1, 3 WEI Zhan-Fei1, 2, 3 1 Key Laboratory for Sustainable Development of Marine Fisheries, Ministry of Agriculture, Yellow Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Qingdao 266071, China; 2 College of Fishery and Life, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China; 3 Laboratory for Marine Fisheries Science and Food Prod