绿色荧光蛋白标记枯草芽孢杆菌y13在油茶体内的定殖-林业科学.pdfVIP

第 53 卷 第 7 期 林 业 科 学 Vol. 53 ，No. 7 2 0 1 7 年 7 月 SCIENTIA SILVAE SINICAE Jul ． ，2 0 1 7 doi :10 ．11707 / j ．100 1-7488 ．20 17070 12 绿色荧光 蛋白标记枯草芽孢杆菌 Y13UV 在 油茶体内 的定殖* 金 勤1 朱丹雪1 周 国英1 李 河1 何苑?1 张 茜1 ，2 (1． 森 林 有 害 生物 防控 湖 南 省 重点实验室 经 济 林培育 与保 护 教育 部 重点实验室 中南 林业科技大学 长沙 4 10004 ; 2 ． 湖 南汽车 工程职 业学 院 株 洲 4 1200 1) 摘 要: 【目的】枯 草 芽孢 杆菌 Y 13 UV 对 油茶 炭 疽 病 具有 良好 的 防 治 效 果 ，研究其 在 油 茶 体内 的定 殖 动 态 ，为 油 茶 炭 疽 病 的防治提 供依 据。【方法 】 通过原生 质 体转 化 法 引入 绿 色 荧 光 蛋白质 粒 ，构建 荧 光 标记 菌 株 。通过 喷 叶 、 灌根 、喷 叶灌根 结合处理 多种 接 种 方 式及重 复接种，测定 菌 株 在 油茶 体内不同组 织部 位 的定 殖 数 量 ，分析其 定 殖 规 律及能 力。【结果 】 标记 菌 株 可以 在 油茶根 、茎 和叶内定 殖 ，单次接 种 当天 ，根内 回收的标记 菌 株 数 量 为 1. 07 × 105 cfu ·g － 1 ; 喷 叶灌根 结合处理 7 天 后 ，油 茶 根 、茎 和 叶 内 标 记 菌 株 的数 量 分 别 为 8. 70 × 102 、5. 00 × 102 和 7. 30 × 102 cfu ·g － 1 ，均 高于 喷 叶 、灌根 单 独 处理 。重复接种 时 ，油茶根 茎 叶内标记 菌 株 的定殖 量 在 接 种 3 ～ 5 天 内达到 高 峰 ，然 后呈现 稳 定趋势 ，20 天 时定殖 量 开始 大 幅 下 降 ，第 30 天 喷 叶 灌 根 处 理 的 油 茶 根 内 的定 殖 量 仅 为 5. 30 × 102 cfu · g － 1 。荧 光 标记 菌 株 生长 较 好 ，稳 定表达 ，对 炭 疽 病 菌 具有 良好 的抑制 效 果。【结论 】枯 草 芽孢 杆菌 Y 13 UV 能通过 喷 叶灌根方 式接 种在 油茶 体内定殖 并传 导 ，有较 好 的定殖 能力 。 关键词 : 绿 色 荧 光 蛋白 ; 枯 草 芽孢 杆菌 ; 油茶 炭 疽 病 ; 定殖 中图分类号: S763. 13 文献标识码: A 文章编号: 100 1 － 7488 (20 17 ) 07 － 0 111 － 07 Colonization of GFP-Tagged Bacillus subtilis Y13 U V in Camellia oleif era Jin Qin1 Zhu