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FXR2酵母双杂交饵载体的构建及酵母菌转化.PDF
第 33 卷第 3 期 南华大学学报·医学版 2005 年 7 月
( )
Vol. 33 No. 3 Journal of Nanhua University Medical Edition Jul. 2005
FXR2 酵母双杂交饵载体的构建及酵母菌转化
1 1 1 1 1 1 1 1 1 2
李斌元 ,何淑雅 ,王桂良 ,马 云 , 孙春莉 , 肖卫纯 ,李 洁 ,闵凌峰 ,彭丹妮 , NanbertZhong
( 1. 南华大学 生化与分子生物学研究室 , 湖南 衡阳 421001 ;
2. 纽约州立基础研究所人类遗传研究室 , 美国 纽约 NY10314)
摘 要 : 目的 构建FXR2 酵母双杂交系统的“饵”质粒 ,并转化酵母菌 ,为筛选 FXR2P 互作蛋白作
基础。方法 提取 pMD18 - T - FXR2 , 酶切后将 FXR2 基因连接到 MATCHMAKER LexA Two - Hybrid
( )
System 中的plexA 质粒上 ,得到“诱饵”Bait - plexA - FXR2 ,导入大肠杆菌扩增 ,筛选阳性克隆并提取
( )
重组 Bait 质粒 ,再转入酵母菌 EGY48 p8op - lacZ 。结果 通过遗传学方法筛选得到构建成功的plexA
- FXR2 ;通过营养缺陷筛选 ,证明 Bait 重组质粒转入酵母菌中。结论 成功构建 Bait 质粒并使酵母菌
转化。
( )
关键词 : 脆性 X 综合征 ; FXR2 基因 ; 酵母双杂交 ; 诱饵质粒 ; EGY48 p8op - lacZ
( )
中图分类号:Q78 文献标识码 :A 文章编号 :1672 - 7444 2005 03 - 0299 - 04
Construction and Transformation of Yeast Two - hybrid
System “Bait ”of FXR2
LI Bin - yuan ,HE Shu - ya , WANG Gui - liang ,et al
( Department of Biochemistry and Molecular Biology Research ,
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