第6章 培养基及灭菌.pptVIP

1/T K（min-1） 第二节 湿热灭菌的理论基础 反应的ΔE越高，lnK对T的变化率越大，即T的变化对K的影响越大 细菌孢子热死灭反应的ΔE很高，而某些有效成分热破坏反应的ΔE较低。 将温度提高到一定程度，会加速细菌孢子的死灭速度，缩短灭菌时间，由于有效成分的ΔE很低，温度的提高也会增大其破坏速度，但幅度较小。由于灭菌时间的显著缩短，有效成分的破坏反而减少 受热物质 ΔE（J/mol） 维生素B12 96232 维生素B1盐酸盐 92048 嗜热脂肪芽孢杆菌孢子 283257 肉毒梭菌孢子 343088 枯草杆菌孢子 317984 第二节 湿热灭菌的理论基础 温度上升，灭菌速率常数增加的倍数大于培养基成分破坏的速率常数倍数。 将温度提高到一定程度，会加速细菌孢子的死灭速度，缩短灭菌时间，由于有效成分的E’很低，温度的提高只能稍微增大其破坏速度，但由于灭菌时间的显著缩短，有效成分的破坏反而减少.因此，培养基灭菌宜采用“高温短时间”灭菌。 第二节 湿热灭菌的理论基础 1/T lnK 第二节 湿热灭菌的理论基础 灭菌时温度从T1 T2时： 第二节 湿热灭菌的理论基础 杀灭细菌芽孢的活化能 E 大于维生素等营养物质破坏的活化能 E`(即E E`) 第二节 湿热灭菌的理论基础 ΔEBS=67000× 4.184（J/mol） ΔEVB=22000× 4.184 （J/mol） 将灭菌温度从105?C提高到127 ?C KVB从0.02（min-1）提高到0.06（min -1 ） KBS从0.12（min-1）提高到40.0（min -1 ） 嗜热脂肪芽孢杆菌孢子和 维生素B1的lnK-1/T图 第二节 湿热灭菌的理论基础 嗜热脂肪芽孢杆菌孢子死灭程度为N/N0=10-16时，灭菌温度对维生素B1破坏的影响 灭菌温度（?C） 达到灭菌程度的时间（min） 维生素B1的损失（%） 100 843 99.99 110 75 89 120 7.6 27 130 0.851 10 140 0.107 3 150 0.015 1 第二节 湿热灭菌的理论基础 第二节 湿热灭菌的理论基础 杀菌锅内灭菌 培养基及物品灭菌所需压强0,098MPa,固体培养基维持20-30min，液体培养基维持15-20min，玻璃器皿及用具维持30-60min。 种子罐、发醉罐、计量罐、补料镶等的空罐灭菌及管道灭菌 通入蒸汽，使罐内蒸汽压强达0. 147MPa，维持45min。灭菌过程中从阀门、边阀排出空气，并使蒸汽达到所有死角。灭菌完毕，关闭蒸汽后，待罐内压力低于空气过滤器压力时，通人无菌空气保持罐压0,098MPa 空气总过滤器和分过滤器灭菌 从过滤器上部通入蒸汽，并从上、下排气口排气，维持压强0. 174MPa，灭菌完毕，通入压缩空气吹干。 种子培养基实罐灭菌 从夹层通人燕汽间接加热至80℃，再从取样管、进风管、接种管通人蒸汽直接加热同时关闭夹层蒸汽进口阀门，升温到121 ℃ ，维待30min，谷氨酸发酵的种子培养基实罐灭菌为110 ℃,维持l0min 发酵培养基实罐灭菌 从夹层或盘管进人蒸汽，间接加热至90 ℃ ,关闭夹层蒸汽，从取样管、进风管、放料管三路进蒸汽，直接加热至121℃，维持10min.谷氨酸发酵培养基实罐灭菌为105 ℃ ，维持25min。 第二节 湿热灭菌的理论基础 发酵培养基连续灭菌 一般培养基为130 ℃,维持5min。谷氨酸发酵培养基为115 ℃,维持6-8min。发酵罐需在培养基灭菌之前直接用蒸汽进行空罐灭菌。空消之后不能立即冷却，先用无菌空气保压，待灭菌的培养基输人罐内后，才可以开冷却系统进行冷却。 油罐(消泡剂罐)灭菌 一般条件为0. 15--0. 18MPa·维持60min。 补料实罐灭菌 视物料性质而定，如糖水为0.1MPa (120 ℃)，保温30min;淀粉料液为121℃维持5min。 尿素溶液灭菌 常用灭菌条件为105 ℃,维持5min。 第二节 湿热灭菌的理论基础 第三节 培养基灭菌的工程设计 一、无菌的标准 根据微生物热死灭方程，要求灭菌后达到绝对无菌是很难做到的，也是不必要的。因此在工程设计中常取N=10-3 二、分批灭菌 1，分批灭菌的设计 在发酵罐中进行实罐灭菌，是典型的分批灭菌。全过程包括升温、保温、降温三个过程 第三节 培养基灭菌的工程设计 孢子热死亡的规律符合 第三节 培养基灭菌的工程设计 二、分批灭菌 因为升温、冷却阶段T是时间t的函数，K不是常数，所以：