2013年级动医预防兽医实习5-多聚酶链式反应(pcr)技术-20151210.pptVIP

特异性强 灵敏度高 皮克(pg=10-12)量级扩增到微克(ug=10-6)水平 能从100万个细胞中检出一个靶细胞 病毒检测的灵敏度可达3个RFU 细菌检测的最小检出率为3个细菌 简便、快速 一次性加好反应液，2～4 小时完成扩增 扩增产物一般用电泳分析 对标本的纯度要求低 血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活组织等组织的粗提DNA 七、PCR特点 八、注意事项 1、污染 PCR能够从极少的样品中，分离出其中的DNA作为模板，对其特定的序列进行大量的扩增。如果样品污染了，特别是扩增系统化中混入了以前扩增的靶序列，将会与样品一样大量扩增，使实验结果难以区别。 2、设对照实验。即除不加入模板DNA外，实验的全过程与本实验完全相同的条件同时进行，对照试验不出现扩增电泳带，说明PCR操作过程没有受到污染，反之，说明已污染。。 八、注意事项 3、隔离操作 PCR扩增仪应与PCR操作场所分开。操作中应戴未污染薄胶手套，所用的试剂及操作仪器应尽可能放在专用柜中。 4、试剂的配制 分装与保存都应在无PCR产物的环境中进行。引物的合成与纯化也要在无PCR产物的环境中进行。试剂分装的量与浓度应与操作用量应基本一致，避免再次分装造成污染。 5、使用PCR专用加样器 PCR专用的微量加样器不可兼做另用。EP管和枪头也应用新品。移液时应慢进慢出，不能过快。 猪伪狂犬病免疫荧光实验 猪伪狂犬病免疫荧