白菜型冬油菜PsbR基因的克隆及低温下表达分析-农业生物技术学报.PDFVIP

Online system: 农 业 生 物 技 术 学 报 Journal of Agricultural Biotechnology 2017, 25(9): 1423-1433 DOI: 10.3969/j.issn. 1674-7968.2017.09.005 白菜型冬油菜PsbR基因的克隆及低温下表达分析 1, 2 2 1 * 1 1 1 1 许耀照 曾秀存 孙万仓 武军艳 方彦 刘自刚 马骊 1甘肃农业大学农学院/甘肃省油菜工程技术研究中心, 兰州730070; 2 河西学院/甘肃省河西走廊特色资源利用重点实验室, 张掖734000 *通讯作者163.com 摘 要 光系统Ⅱ亚基蛋白R(photosystem Ⅱsubunit R, PsbR)是光系统Ⅱ的一个小分子亚基蛋白，其在 植物光合生理活动过程中发挥重要作用。为探究PsbR基因在白菜型冬油菜(Brassicacampestris)抗寒过程 中的功能，本研究以强抗寒白菜型冬油菜陇油7 号为材料，运用mRNA 差异显示技术DDRT-PCR (differential display reverse transcription PCR) 和cDNA 末端快速扩增技术(rapid-amplification of cDNA ends, RACE)方法从叶片中克隆到PsbR基因(GenBank 登录号为KC894423)全长。序列分析结果显示，该 基因全长为570 bp ，编码包含417 bp 的一个完整开放阅读框(open reading frame, ORF)，其编码138个氨基 酸，蛋白分子量约为14.39 kD ，等电点为9.42 ，该蛋白属于PsbR 超家族，与甘蓝(B.oleraceavar. oleracea) 、 山嵛菜(Eutremasalsugineum)和芥菜型油菜(B.juncea) 的PsbR 蛋白相似性关系较近。采用qRT-PCR 研究 低温胁迫下白菜型冬油菜PsbR基因的相对表达量以及应用CIRAS-2 便携式光合作用测定系统和FMS-2 便携脉冲调制式荧光仪研究自然降温过程中冬油菜功能叶的净光合速率(Pn)和光合系统Ⅱ(photosystem Ⅱ, PS Ⅱ)原初光能转化效率(Fv/Fm) 。研究结果表明，随着胁迫温度(4 ℃, -4 ℃和-8 ℃) 降低，PsbR相对表 达量下降，而Pn和Fv/Fm也随自然温度降低而下降，说明低温可能会抑制PsbR基因的表达，进而导致白 菜型冬油菜光合速率下降、光系统Ⅱ光能转化效率降低。研究结果为解析白菜型冬油菜PsbR基因的生 物学功能和抗寒机制提供了部分理论依据。 关键词 白菜型冬油菜，低温胁迫，光合系统Ⅱ(PS Ⅱ) ，光系统Ⅱ亚基蛋白R 基因(PsbR) ，表达分析 中图分类号 S565.4, Q786 文献标识码 A Cloning of PsbR Gene in Winter Turnip Rape (Brassicacampestris) and Its Expression Analysis Under Low Temperature Stress XU Yao-Zhao1, 2 ZENG Xiu-Cun1, 2 SUN Wan-Cang1 * WU Jun-Yan1 FANG Yan1 LIU Zi-Gang1 MA Li1 1 College of Agronomy, Gansu Agricultural University/Gansu Province Rapeseed Engineering Research Center, Lanzhou 730070, China; 2 Hexi University/Key Laboratory of Hexi Corridor Resources Utilization of Gansu, Zhangye 734000, China * Corresponding author,163.com Abstract Photo