不同狂犬疫苗免疫后血清交叉保护作用研究.pdfVIP

摘 要  不同狂犬疫苗免疫后血清交叉保护作用研究 目的：狂犬病是一种由狂犬病毒引起的致死性疾病，注射狂犬病疫苗是预防 发病的重要手段。我国存在多种狂犬病毒流行株，这就要求疫苗能刺激机体产生 对不同流行株具有交叉保护的广谱中和抗体。目前对我国市售的狂犬病疫苗的广 谱保护性的研究较少，因此本研究将进行动物实验检测这些狂犬疫苗对不同株病 毒的保护性。此外，研究表明多种包膜病毒（如 HIV-1 ，流感病毒，丙型肝炎病 毒）膜蛋白的糖基化会使病毒逃避抗体的中和作用，而狂犬病毒包膜蛋白 G 蛋 白这方面的研究比较少，本研究也将探索狂犬病毒 G 蛋白的糖基化对病毒感染 能力和抗体中和作用的影响。 方法：本研究使用假病毒系统对我国狂犬疫苗的广谱保护性进行验证。选用 四种不同株病毒制备的狂犬病疫苗对balb/c 小鼠进行分组免疫并收获血清。制备 几种具有 HIV-1 核衣壳和狂犬病毒 G 蛋白的假病毒，该假病毒携带荧光素酶报 告基因，具有单轮感染能力，感染细胞可以表达荧光素酶。将假病毒与免疫血清 共孵育后感染 BHK-21 细胞，根据荧光素酶表达量确定免疫血清对不同株狂犬假 病毒中和能力。另一方面，通过定点突变的方法增加或减少病毒 G 蛋白上的糖 基化位点，检测突变株病毒的感染能力以及免疫血清对病毒的中和能力。