4种虫草真菌生长适宜碳、氮源的研究.pdfVIP

一404一 江苏农业科学2011年第39卷第6期 张安宁，袁书林，孙林超。等．4种虫草真菌生长适宜碳、氪源的研究[J】．江苏农业科学，2011，39(6)：404-406． 4种虫草真菌生长适宜碳、氮源的研究 张安宁1，袁书林1”，孙林超1，张建华1，郭小华2 (1．江苏食品职业技术学院，江苏淮安223003；2．淮安淮大科技发展有限公司，江苏淮安223005) 摘要：通过平皿筛选的方法，比较分析了4种虫草真菌在不同碳、氮源培养基上的生长面积和生长情况，从而筛 选出它们生长适宜的碳、氮源。结果表明：蛹虫草菌种生长的最适碳源为大米粉，最适氮源为脱脂奶粉和蚕蛹粉；蝙蝠 蛾拟青霉菌种生长的最适碳源为大米粉和葡萄糖，最适氮源为花生粉、脱脂奶粉和蛋白胨；虫草被孢霉菌种生长的最 适碳源为葡萄糖，最适氮源为蛋白胨；中国被毛孢菌种生长的最适碳源为葡萄糖和蔗糖，最适氮源为蛋白胨、酵母膏和 脱脂奶粉。 关键词：蛹虫草；碳源；氮源；蝙蝠蛾拟青霉；虫草被孢霉；中国被毛孢 中圈分类号：s567．3+50．1文献标志码：A 文章编号：1002—1302(2011)06-0404一03 冬虫夏草是享誉海内外的名贵传统中草药，具有免疫调 氮源，分别以大豆粉、绿豆粉、豆粕粉、花生粉、蚕蛹粉、脱脂奶 节、抗肿瘤等多种功效【1。-。由于天然冬虫夏草需求量的不 粉、酵母膏、牛肉膏、鱼粉、氯化铵、硫酸铵、柠檬酸铵为氮源， 断加大及资源的逐年萎缩，冬虫夏草代用品的开发成为当前 等量代替1．5％的蛋白胨，进行氮源筛选试验。 冬虫夏草研究的热点之一。相应研究目前主要集中在虫草类 1．3试验方法 真菌的发酵培养上，生产菌种主要有蝙蝠蛾被毛孢(即中国 将上述培养基组分加入到一定量的水中，搅拌煮沸，让琼 被毛孢)以及蝙蝠蛾拟青霉、虫草被孢霉、蛹虫草等。进行虫 脂完全溶解，121℃下高压蒸汽灭菌20min，灭菌后的培养基 草类真菌的发酵生产，首先应确定其培养基组成和培养条件， 在无菌条件下倾倒一定量至9cm直径灭菌平皿中，制作平皿 适宜的培养基可以节省成本、提高产量。因此，本试验通过平 培养基。 皿培养的方法，研究筛选了蛹虫草、蝙蝠蛾拟青霉、虫草被孢 待平皿培养基冷却凝固后，无菌条件下在平皿中心处接 霉、中国被毛孢4种常见虫草类真菌生长的适宜碳、氮源，为 种1irln]2大小菌苔l粒，恒温生化培养箱中培养。其中蝙蝠 虫草类真菌的发酵生产提供参考依据。 蛾拟青霉、蛹虫草、虫草被孢霉3种菌种的培养温度为24℃， 培养时间为7d；中国被毛孢的培养温度为19℃，培养时间为 1材料与方法 60 d。达到培养时间后，取出平皿，观察菌丝生长情况，包括 1．1供试菌种 菌丝的颜色、长势及菌苔厚度等，并用透明硫酸纸描下菌丝生 蝙蝠蛾拟青霉(编号：PH—I)、蛹虫草(编号：CM一1)、虫长的轮廓范围，再用求积仪计算菌丝生长的面积大小。 草被孢霉(编号：MH一1)、中国被毛孢(编号：HS一1)4株虫每组培养基做3个平皿，菌丝生长面积结果用平均值4- 草类真菌菌种，由笔者所在实验室保藏。 标准差表示。 1．2培养基组成 2结果与分析 1．2．1基础培养基葡萄糖3％，蛋白胨1．5％，磷酸二氢钾 0．1％，硫酸镁0．05％，琼脂2％。 2．1碳源筛选结果 1．2．2碳源筛选培养基以基础培养基为基础，改变其中的 4种虫草真菌在不同碳源培养基上的菌丝生长面积见表 碳源，分别以蔗糖、麦芽糖、乳糖、可溶性淀粉、玉米粉、大米 1。由表1可以看出，4种虫草真菌在本试验所选择的碳源上 粉、次粉、麦麸为碳源，等量代替3％的葡萄糖，进行碳源筛选 均能不同程度生长，对碳源没有严格的选择性。