密度梯度离心-仪器信息网.PPT

* 高速离心机：最大转速为20000～25000rpm，最大容量可达3升。转头多样。一般都有制冷系统，以消除高速旋转转头与空气之间摩擦而产生的热量，离心室的温度可以调节和维持在0～40C。通常用于微生物菌体、细胞碎片、大细胞器、免疫沉淀物等的分离纯化工作，但不能有效地沉降病毒、小细胞器(如核蛋白体)或单个分子。 五、离心机的分类与结构 * 超速离心机：转速可达50000～80000rpm，相对离心力最大可达510000g，离心容量由几十毫升至两升，设有冷冻系统、真空系统和安全保护系统。分离的形式是速率区带离心和等密度区带离心。最著名的生产厂商有美国的贝克曼公司和日本的日立公司等。 五、离心机的分类与结构 * 仪器特点■转速高达70,000rpm。 ■日备有两种检测器，可供选择：．紫外(XL-A) ：190-800nm，高灵敏度．干涉光(XL-I)：适用于没有紫外吸收之样品，如碳水化合物，高浓度样品(50D值)■专利椭圆形全息衍射光栅、及四倍光束系统，减少散射光干扰。■采用光电倍增管，大大提高检测灵敏度。■精确可靠的控制软件及数据处理。应用范围■绝对／相对分子量测定■样品纯度，浓度测定■分子的聚和，解离分析■热动力学和流体力学参数确定■核酸，蛋白及病毒测定与分析■分子间之互相作用■污泥处理设备配合核磁共振应用 分析超速离心机? * 普通离心机：电动机、离心转盘（转头）、调速器、离心套管与底座。 高速、超速（冷冻）离心机：驱动电机、制冷系统、真空系统（超离有）、显示系统、自动保护系统和控制系统组成。必要的配件为离心转头和离心管。??????? 五、离心机的分类与结构 * （1）离心转头 角式转头：角式转头是指离心管腔与转轴成一定倾角的转头。 荡平式转头：这种转头是由吊着的4或6个自由活动的吊桶（离心套管）构成。 垂直转头：其离心管是垂直放置。 区带转头：区带转头无离心管，主要由一个转子桶和可旋开的顶盖组成。 连续流动转头：可用于大量培养液或提取液的浓缩与分离，转头与区带转头类似。 五、离心机的分类与结构 * 五、离心机的分类与结构 （1）离心转头 * 离心转头的注意事项 1.每个转头各有其最高允许转速和使用累积限时，使用转头时要查阅说明书，不得过速使用。每一转头都要有一份使用档案，记录累积的使用时间，若超过了该转头的最高使用限时，则须按规定降速使用。 2.转头是离心机中须重点保护的部件，搬动时要小心，不能碰撞，避免造成伤痕，转头长时间不用时，要涂上一层上光腊保护。 五、离心机的分类与结构 （1）离心转头 离心机转头损坏的原因 （操作或使用不当所造成的） 过速 腐蚀 金属疲劳 不平衡 五、离心机的分类与结构 （1）离心转头 * 玻璃离心管绝对不能在高、超速离心机上使用。 ＰＡ和ＰＰ管：化学性能稳定，半透明，能耐高温消毒。 ＰＣ管：透明度好，能耐高温消毒。但不耐强酸强碱及某些有机溶剂。主要用于５万转／分以上离心。 ＣＮ管：质地较软，透明，不能高压消毒，但不耐强酸强碱及某些有机溶剂，适合于蔗糖、甘油等密度梯度离心。因透明，利于收集。 五、离心机的分类与结构 离心管的选用 * 六、离心机的使用和维护 离心方法的选择一般是根据样品颗粒的质量和密度，选择合适的离心方法。 离心机的转速和离心时间的确定：离心分离的效果除了与离心机种类、离心方法、离心介质及密度梯度外，实际操作时，与离心机转速、离心时间、离心介质的pH值和温度等条件有关。 * 离心机的使用和维护原则 离心机使用时要放置在平稳、坚固的台面上。 离心器支架必需在安置离心管后运转，严禁空架运转。 选择合适的转头，控制转头的转速。 按需选用离心管 注意转头内清洁，以保持平衡。 注意预冷处理 定期校准 六、离心机的使用和维护 * 离心操作的注意事项 使用各种离心机时，必须事先在天平上精密地平衡离心管和其内容物，转头中绝对不能装载单数的管子，当转头只是部分装载时，管子必须互相对称地放在转头中。 装载溶液时，要根据各种离心机的具体操作说明进行。有的离心管无盖，液体不得装得过多，以防离心时甩出，造成转头不平衡、生锈或被腐蚀。而制备性超速离心机的离心管，则常常要求必须将液体装满，以免离心时塑料离心管的上部凹陷变形。严禁使用显著变形、损伤或老化的离心管。 六、离心机的使用和维护 * 若要在低于室温的温度下离心时。转头在使用前应放置在冰箱或置于离心机的转头室内预冷。 离心过程中不得随意离开，应随时观察离心机上的仪表是否正常工作，如有异常的声音应立即停机检查，及时排除故障。 离心操作的注意事项 六、离心机的使用和维护 使用前一定要先阅读手册！ Refer to rotor manuals for operation Use lo