掌握考马斯亮兰法测定蛋白质含量的试验技术.PPTVIP

实验七：SOD的含量测定 一、超氧化物歧化酶的基本特性及生理功能 1、超氧化物歧化酶的组成 超氧化物歧化酶是一种能催化超氧阴离子发生歧化反应的金属酶，按金属辅基不同分为三类： Cu,Zn-SOD Mn-SOD Fe-SOD 2、超氧化物歧化酶的生理功能 （1）延缓由于自由基侵害引起的衰老现象 （2）治疗由自由基损伤而诱发的疾病 （3）消除肌肉疲劳 （4）提高人体的抵抗力 蛋白质含量测定方法 定氮法 紫外分光光度法 双缩尿法（Biuret法） Folin－酚试剂法（Lowry法） 考马斯亮蓝法（Bradford法） 其中Bradford法和Lowry法灵敏度最高，比紫外吸收法灵10～20 倍，比Biuret法灵敏100倍以上。定氮法虽然比较复杂，但较准确，往 往以定氮法测定的蛋白质作为其他方法的标准蛋白质。值得注意的 是，这后四种方法并不能在任何条件下适用于任何形式的蛋白质，因 为一种蛋白质溶液用这四种方法测定，有可能得出四种不同的结果。 每种测定法都不是完美无缺的，都有其优缺点。 在选择方法时应考虑的几点因素 ① 实验对测定所要求的灵敏度和精确度； ② 蛋白质的性质； ③ 溶液中存在的干扰物质； ④ 测定所要花费的时间。 考马斯亮蓝法（Bradford法），由于其 突出的优点，正得到越来越广泛的应用。 一、紫外