2海洋生物资源开发与利用科技创新团队申请书.doc

附件2： 台州市重点创新团队 经核实，本表中所填数据准确，情况介绍与实际情况相符。 本人及单位对所填的数据和情况介绍的真实性负责。 牵头单位法人代表（签字）： 年 月 日 团队带头人（签字）： 年 月 日 牵头单位（盖章） 年 月 日。团队建设发展契机，进一步明确目标提高水平三、主要学术技术成绩、创新点及其科学意义、经济和社会效益 着重阐述近五年来在科学研究、高新技术创新及集成创新性研究成果及其产生的科学意义、经济和社会效益；阐明上述成果在国内外同行、同行业中所处的水平，具备的优势和特色；阐明上述成果对于发展我省高新产业、优势产业和重点产业的贡献；5000字以内。 3.1 阿托伐他汀产业化中关键手性生物制造技术的研究 在手性生物催化领域作了多年的探索和研究，积累了雄厚的研究基础和丰富的研究经验。已在立体选择性生物催化剂的发现方法学、高效生物催化过程的设计原理、酶的表征等方面进行大量研究，涵盖了从生物催化剂发现、制备、表征到应用等各个方面： 1）建立了基于荧光探针的高通量筛选模型等具有较强通用性的氧化还原酶、脱卤酶、腈水解酶高通量筛选体系，为新型氧化还原酶、脱卤酶、腈水解酶的发现和改造提供了有力工具。借助上述高通量筛选平台，开展了大范围、多目标的腈转化酶筛选过程，构建了结构合理、内涵丰富的氧化还原酶、脱卤酶、腈水解酶微生物库。库内共保藏菌株236株，其中向中国典型培养物保藏中心递交专利菌株18株。 2）构建了的手性生物催化技术。建立了显色法、薄层色谱法等多种快速检测方法；解决了多种手性对映异构体；熟练掌握了相关菌种从生长代谢、产酶特性到游离细胞、游离酶生物转化的一整套工艺流程。 的分离纯化、酶学特性、N端氨基酸测序Chitinolyticbacter meiyuanensis 的筛选鉴定及其发酵产几丁质酶研究 几丁质在地球上的含量非常丰富，其水解产物N-乙酰胺基葡萄糖及几丁寡糖可广泛应用在医药、化工、食品、环境等许多领域，需求量日益增加。但是，传统的几丁质处理方法主要是物理化学法，即用强酸除去盐类、蛋白等，用强碱去除脂类或脱除乙酰基等一系列技术处理，变成可溶解的几丁衍生物从而能够被利用。理化方法会造成严重的环境污染，从而增加三废处理成本。此外，该方法反应剧烈难以控制，很难得到纯度较高的产物。酶法处理几丁质具有以可再生资源为原料，反应条件相对温和，对环境友好等优点。具有巨大的发展前景。本研究在国家863计划项目(NO.2010AA101501)的资助下，围绕高几丁质酶合成菌株筛选鉴定、发酵条件优化、几丁质酶纯化与酶学性质、几丁质酶基因克隆及几丁质酶水解几丁质实验等开展研究并得到以下研究成果： 1）从自然界筛选得到一株高产几丁质酶的细菌经过鉴定，确定该菌属变形菌纲（Proteobacteria）奈瑟菌目（Neisseriales）奈瑟菌科（Neisseriaceae）下的一个新属新种，命名为Chitinolyticbacter meiyuanensis SYBC-H1，并提交至中国普通微生物菌种保藏管理中心（菌株编号CGMCC 3438）和美国典型微生物菌种保藏中心（菌株编号ATCC BAA-2140）保藏。 2）研究了C. meiyuanensis SYBC-H1在优化培养基与基础培养基发酵过程中胞内外酶活变化与氧化胁迫和抗氧化酶的关系。结果表明，在菌体高产几丁质酶时，其胞内外丙二醛、过氧化氢含量明显较高，Vc含量、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性等明显上升；说明C. meiyuanensis SYBC-H1几丁质酶基因表达受氧化还原调控。 ）在考察碳源对酶活的影响时发现，以果糖为碳源的酶活远高于以葡萄糖为碳源时的酶活，克隆了C. meiyuanensis SYBC-H1 ABC转运系统中ATP酶、细胞膜周质糖结合蛋白及氨基糖苷转运蛋白基因，研究了其在C. meiyuanensis SYBC-H1发酵产几丁质酶中的作用。结果表明，C. meiyuanensis SYBC-H1的ATP酶基因全长1236 bp，编码377个氨基酸残基；细胞膜周质空间糖结合蛋白基因全长1329 bp，编码292个氨基酸残基；氨基糖苷转运蛋白基因全长1027 bp，编码340个氨基酸残基。这些基因的表达与其胞外几丁质酶活性增高相关，说明了ABC转运系统在该菌几丁质酶合成中的可能作用，为该菌进一步的分子改造构建工程菌提供了理论依据。 ）根据与C. meiyuanensis SYBC-H1遗传距离较近的微生物已经克隆出的几丁质酶基因设计17对引物，从C. meiyuanensis SYBC-H1基因组中克隆得到C. meiyuanensis SYBC-H1几丁质酶基因CHI1和CHI2，基因全长分