基因工澈吞菌生长代谢的特点.ppt

第五节 基因工程菌生长代谢的特点 菌体的生长通常用比生长速率来表示。 控制菌体的生长对提高质粒的稳定性、减少代谢副产物积累、提高外源蛋白产率有重要意义。 工程菌培养可通过选用不同的碳源控制补料和稀释速率等方法来控制菌体的生长。 大肠杆菌的蛋白/菌体量的比值是基本恒定的，因而菌体的生长速度反映了蛋白质的合成速度。 培养条件的改变，都会改变菌体的能量代谢和小分子前体的供应，影响生物大分子的合成和菌体的生长。 一、菌体的生长与能量的关系 碳源物质是组成培养基的主要成分。 碳源物质为细胞提供能量，当菌体生长所需能量大于菌体有氧代谢提供的能量时，菌体会产生乙酸，导致培养基的pH值下降，从而影响菌体的生长。适当提高pH，可减少乙酸的抑制作用。 分批培养中选择不同的碳源，连续培养中控制稀释速率等都能一定范围内控制菌体的生长，从而控制乙酸的产生，减少它的抑制作用。 加入蛋氨酸和酵母提取物都能减少乙酸的产生。 大肠杆菌中克隆携氧能力的VHB蛋白的基因，以提高菌体的氧摄取能力，可提高菌体比生长速率和菌体密度。 采用磷酸乙酰化酶缺陷株作为宿主细胞，阻止乙酸产生，可提高产量。 二、菌体生长与前体供应的关系 前体：细胞从外界吸收的或在代谢途径中形成的，可被