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实验三 药敏 实验内容 一、纸片扩散法（K-B法） 二、稀释法 (MIC) 实验目的 一、掌握纸片扩散法的原理、操作方法、结果的判断及其临床意义。 二、掌握纸片扩散法的质量控制(采用标准菌株控制可变因素)。 三、掌握肉汤稀释法抗生素敏感性试验的原理、操作方法、结果判断及临床意义。 四、了解稀释法的质量控制(采用标准菌株控制可变因素)。 纸片扩散法（K-B法） 器材与试剂 菌种： 金黄色葡萄球菌ATCC25923和金黄色葡萄球菌临床种的6小时肉汤培养物，调整浓度至0.5麦氏比浊管（相当于1.5×108CFU/ml)；或挑新鲜培养的单个菌落，在无菌生理盐水中研磨，校正其浓度至0.5麦氏比浊管。 培养基：水解酪蛋白培养基（MH琼脂）。 其他：无菌棉签、抗菌纸片、镊子、直尺等。 原理：含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸取琼脂中的水分溶解，不断向纸片周围区域扩散，形成递减的梯度浓度。在纸片周围抑菌浓度范围内的细菌生长被抑制，形成透明的抑菌圈。抑菌圈大小反映测试菌对测定药物的敏感程度。 方法:（4人一组，2人做金葡菌标准种，2人做临床种，每种菌选4个不同的药物纸片） 1、制备MH琼脂平板：将加热融化的琼脂冷却至60℃左右时倾注于直径为9cm的无菌平板中，使琼脂厚度为4mm，待琼脂凝固后使用，如有冷凝水产生，可放置37