疫苗分离纯与化技术.pptxVIP

疫苗分离纯化技术宫喜魁为什么？疫苗生产过程中不可避免的有一些杂质，如细菌菌体、细胞碎片、血清、杂蛋白、核酸等。为了得到具有高纯度、无菌性和安全性的疫苗，要除去这些杂质。有哪些？传统疫苗的分离纯化方法 连续离心、沉淀、过滤或萃取等物理、化学方法。我国采用酸沉淀法生产百日咳灭活疫苗，就是由菌体培养液加甲醛杀菌灭活后，用HCl调pH至3.8~4.4，静置十几小时自然沉淀出菌体和可溶性抗原，再离心、洗涤而得。现代分离纯化技术膜过滤、分子筛层析、离子交换层析、亲和层析等怎么样？传统纯化分离技术盐析盐析一般是指溶液中加入无机盐类而使某种物质溶解度降低而析出的过程。如：加浓（NH4）2SO4使蛋白质凝聚的过程。盐析可以通过各种物质的溶解度的不同进行分离，但是溶解度相同或差异不大很难进行分离。酸沉淀酸沉淀是指溶液的ph改变，使得溶液中某些物质的溶解度降低，从而凝聚沉淀。过酸容易使得蛋白质变性。超速离心蔗糖、CsCl、KBr密度梯度离心处理样品量太少、操作复杂、难以控制采用此技术纯化嗜血流感细菌(Haemophilus influenzae)外膜脂蛋白P6，先连续离心(9000g)收获菌体超声破碎，再高速离心(21000g)沉淀出肽聚糖和含有P6的未破碎细胞，最后超速离心(100000g)除去肽聚糖，加压透析得到目的抗原组分。现代疫苗纯化分离技术膜过滤膜过滤是一种与膜孔径大小相关的筛分过程，以膜两侧