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- 2017-10-18 发布于浙江
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菌种操作规与程
菌种操作规程 (Master Operation Procedure for ARA Production Strain) CA/WA001—2004版 1目的 建立菌种操作规程,确保菌种保藏、自然选育、生产供种操作规范性,提供优质高产的生产菌种。 2 范围 生产一部菌种组。 3 责任 菌种组操作人员负责本操作规程的实施。 安瓿管的制备 空白安瓿管的制备 安瓿管有三种:手榴弹形、球形、直形。任意选取一种放于重铬酸钾-浓硫酸溶液(100g/mL)中浸泡10h,然后取出用自来水反复冲洗多次,最后用蒸馏水洗二次,烘干。将写有菌种编号及制备膜的标签放入安瓿管内,将有字的一面向管壁,塞上棉塞,121℃灭菌1小时。 脱脂牛奶的制备 将买来的新鲜牛奶倒入离心管中以3000转/分离心15分钟,去掉上层的脂,下层即为脱脂牛奶。 脱脂好的牛奶倒入试管(Φ18×200mm)或250mL三角瓶中,置消毒锅中灭菌,灭菌温度110℃、时间20分钟。 按10%的抽样率抽取灭菌好的脱脂牛奶作无菌实验,每支肉汤倒入约1mL左右的牛奶。然后置37℃恒温间培养48h观察肉汤变化情况,判定是否染菌,如无染菌,即可使用。 孢子悬浮液的制备 将经过摇瓶考察指标符合要求对照的斜面孢子,制成高浓度的孢子悬浮液,用无菌的毛细吸管或注射器将菌液分装于安瓿管底部,每管装0.3~0.5mL 预冻及速冻 灌装好
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