方 血红蛋白的提取和分离.ppt.pptVIP

血红蛋白的结构示意 根据课题背景回答下列问题： 2003年4月14日宣布人类基因组序列图完成 这标志着进入了________和——————时代。 人类基因组：——————————————————— 蛋白质组：__________________________ 主要是对____________________________ 后基因组 蛋白质组 指DNA分子所携带的全部遗传信息。 生物个体表达的蛋白质分子的总和 蛋白质功能的研究 血红蛋白质的主要功能是：______________________________。 负责血液中O2和CO2的运输 思考1 分离生物大分子的基本思路是什么？ 选用一定的——————的方法，分离具有不同—————————的生物大分子。 思考2 蛋白质的分离和提取的原理是什么？ 根据蛋白质各种______________，如___________、和————、——————————————、3、溶解度、4、吸附的性质和—————————————等等，可以用来分离不同蛋白质。 特性的差异 1、分子的形状 大小 物理或化学 物理或化学性质 2、所带电荷的性质和多少 5、对其他分子的亲和力 思考3 高温灭菌和酒精消毒分别利用蛋白质 的何种作用，作用结果是什么被破坏？ 变性 思考4 人们用鸡的红细胞提取DNA，用人 的红细胞提取血红蛋白的原因是什么？ 鸡的红细胞具有________，含有DNA，便于进行DNA的提取；人的红细胞无_______，结构简单，__________含量丰富便于提取血红蛋白。 变性 空间结构 细胞核 细胞核 血红蛋白 一、基础知识： ㈠ 凝胶色谱法（也叫分配色谱法）： 2、凝胶： 一些微小多孔的球体分子筛（内含许多贯穿的通道，由多糖类构成如葡聚糖、琼脂糖） 根据被——————————————————————，利用具有网状结构的_____（分子筛）的作用，来进行分离。 1、概念： 分离物质的蛋白质相对分子质量的大小 凝胶 3、原理：当不同的蛋白质通过凝胶时，相对__________________的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程_____，移动速度_____，而_________________的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在_________移动，路程______，移动速度_____，相对分子质量不同的蛋白质因此得以分离。 4、具体过程 相对分子质量较小 较长 较慢 相对分子质量较大 凝胶外部 较短 较快 也称：洗脱瓶 1、概念：由————————溶解于水中，具有缓冲作用的溶液叫做缓冲溶液。 ㈡ 缓冲溶液： 2、缓冲作用： 在一定范围内，能够抵制———————————对溶液—————的影响，维持PH基本不变。 外界的酸、碱或稍加稀释 PH值 1~2种缓冲剂 调节缓冲剂的———————就可以制得—————————————使用的缓冲液。 使用比例 在不同PH范围内 3、缓冲溶液的正确配制和PH的准确测定的重要性 生物体进行的各种生物化学反应都是在一定的PH下进行的，为了能够在实验条件下—————————————的过程，就必须保持———————————————————————的基本一致。 思考：说出人体血液中缓冲对。 NaH2PO4 / Na2HPO4 H2CO3 / NaHCO3 准确模拟生物体内 体外溶液的PH与体内环境中 ㈢电泳： 1、概念：_________________________ ___________________ 思考：在血红蛋白提取和分离的整个实验中使用的缓冲液是什么？它的目的是什么？ 使用的是_________，目的是利用缓冲液模拟_____________，保证血红蛋白的____________。） 磷酸缓冲液 细胞内的PH环境 正常结构和功能 只有血红蛋白_________才能保证的材料的科学研究；材料为____色便于_____。 指带电粒子在电场作用下发生迁移的过程。 仍具有活性 观察 红 2、原理：许多重要的生物大分子，如 ____________等都具有_____________ 在 _________下，这些基团会带上_________ 。在电场的作用下，这些带电分子会向着与其____________________移动。电泳利用了待分离样品中各种分子_______________以及分子本身的______、_______的不同使带电分子产生不同的__________，从而实现样品中各种分子的分离。 多肽、核酸 可解离的基团 正电或负电 所带电荷相反的电极 带电性质的差异 大小 形状的 迁移