分枝杆菌实验室的标准化与操作.pptVIP

直接涂片法步骤 染色（1） 玻片放在染色架上，玻片间距保持10毫米以上的距离，染色架下空间足够，方便加热 火焰固定（5秒钟将玻片过火4次） 滴加石炭酸复红染液，盖满玻片。 加热至出现蒸汽，勿使沸腾。脱离火焰，保持5分钟。 高海拔地区（西藏、青海）：定期过滤染色液；如室温低则用前热水浴加热染液；火焰加热，由于海拔高、沸点低，需加热多次 染色(2) 脱色： 轻缓冲洗 沥水。 滴加脱色液，保持1分钟。 如不彻底，重复。 1.接通电源，打开开关上升聚光镜至最高，调节光圈70－80％大小2.将涂片放在载物台上，痰膜朝上 显微镜检查 读片时，首先从左至右观察； 纵向向下转换一个视野； 然后从右向左观察 分枝杆菌培养 培养基质控 前处理 接种和孵育 结果和报告 四、结果的观察与报告 接种后第3、7天各观察一次菌落生长情况 此后每周观察一次，直至满8周 每次观察记录菌落生长及污染情况 结核分枝杆菌的生长要求： 专性需氧菌 最适PH为6.5～7.2 温箱设定温度为36℃,温度范围35－37 小结 – 操作流程 涡旋振荡 1分钟 痰标本中加入 1-2倍体积 4%NaOH 分别接种0.1ml 前处理液至2 只培养基斜面 第3天、7天、此后每周 观察一次直至第九周, 记录菌落生长和污染 置36C温 箱培养 室温静置 15分钟 4 3 2 5 6 1 * * * * Smear