美洲黑杨CCoA OMT基因cDNA克隆及反义植物表达载体构建.pdfVIP

分子植物育种，2008年，第6卷，第1期，第136—140页 Molecular Plant Breeding，2008，Vo1．6，No．1，136—140 新基因、新种质、新品种 New GeneGermplasm 美洲黑杨CCoA OMT基因cDNA克隆及反义植物表达载体构建 夏琼梅1,2田敏1’范正琪1李纪元1段红平2 1中国林业科学研究院亚热带林业研究所，富阳，31 14002；2云南农业大学农学与生物技术学院，昆明，650201 通讯作者，tminl 15@163．tom 摘 要 据已报道的CCoAOMT(caffeoy1．CoA 3一O．methyltransferase)基因的cDNA序列设计一对兼并引物， 从美洲黑杨当年生嫩枝的次生木质部中提取总RNA，通过RT．PCR的方法获得约750 bp的特异性扩增产 物。测序结果显示，克隆的序列与GenBank中注册的CCoAOMT基因cDNA同源性最高达99％。该基因的 cDNA序列已在GenBank上登录(登录号：EF153198)。将克隆的美洲黑杨CCoAOMT基因的cDNA序列反向 连接到植物表达载体pBI121中CaMV 35S启动子的下游，成功构建了美洲黑杨CCoAOMT基因的反义表达 载体pBI．CCoAOMT，为进一步通过反义技术降低杨树木质素含量奠定了基础。 关键词 美洲黑