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植物细胞工程-柯其昌
例题:下列有关植物组织培养过程中细胞脱分化的说法,不正确的是( ) A. 已经分化的细胞失去特有的结构和功能而转变成未分化的细胞的过程 B. 已经分化的细胞转变为具有分生能力的薄壁细胞,进而形成植物愈伤组织的过程 C. 离体的植物组织在一定的条件下分化出根和芽的过程 D. 离体的植物组织在脱分化形成愈伤组织的过程中必须经过有关激素的诱导 例题:在生物体内,细胞没有表现出全能性,而是分化为不同的组织、器官,是因为( ) A. 细胞丧失了全能性 B. 基因的表达有选择性 C. 不同的细胞内基因不完全相同 D. 在个体发育的不同时期,细胞内的基因发生了变化 植物细胞表现全能性的条件:①离体。②一定的营养物质。 ③ 适当配比的植物生长调节剂。 ④ 适宜的外界条件:无菌,温度,pH,光照。 例题:下图是植物组织培养的简略表示。据此回答: (1)①表示 ,它能被培养成为④的根本原因是 。 (2)②表示 ,它与①相比分化程 , 全能性 。 (3)若①是花药,则④是 ,继续对其使用 处理可获得 正常植株, 该育种过程称为 。 (5)若①是胡萝卜根尖细胞,则培养成的④的叶片的颜 色是 ,这说明根尖细胞 。 离体的植物器官、组织或细胞 植物细胞具有全能性 愈伤组织 低 高 单倍体植株 秋水仙素 单倍体育种 绿色 含有与叶绿体形成相关的基因 纯合 * 第二章 克隆技术 第二节 植物的克隆 克隆:是指无性繁殖,即不通过两个分子、两个细胞或两个个体的结合,只由一个模板分子、母细胞或母体直接形成新一代分子、细胞或个体的过程。 什么是克隆? 分子水平上的基因克隆 基因克隆:重组载体通过宿主细胞的无性繁殖使目的基因扩增,再用某探针选择、钓取目的基因。 细胞水平上的细胞克隆 杂交瘤细胞的培养 个体水平上的克隆 玫瑰的插枝繁殖 原因:细胞核具有基因组全套遗传信息,有发育成完整个体的潜能。 例题:有关克隆技术的叙述,错误的是( ) A. 基因克隆是指目的基因的复制、分离过程 B. 细胞克隆技术在利用杂交瘤制备单克隆抗体的操作中得到充分运用 C. 个体克隆是现代生物技术中的关键技术 D. 生物克隆最基本的条件是细胞具有发育全能性 什么是植物组织培养? 愈伤组织 胚状体 试管苗 外植体 完整植株 植物细胞的全能性 植物细胞全能性:植物体的每个生活细胞都具有遗传上的全能性,因而具有发育成完整植株的潜能。 愈伤组织 胚状体 试管苗 植物组织培养的一般程序 原因:每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质,都有发育成为完整个体所必需的全部基因。 培养基的组成:营养物质+植物生长调节剂+0.7%~1%琼脂+灭菌。 (1)培养基的配制 水,无机盐,蔗糖,维生素和氨基酸等 高压蒸汽灭菌 (2)外植体的切取和消毒 外植体:离体的植物器官、组织、细胞或原生质体。 酒精、氯化汞 (3)外植体的接种和培养 愈伤组织:一种由相对没有分化的活的薄壁细胞团组成的新生组织。 胚性细胞:细胞质丰富、液泡小而细胞核大。 不含有叶绿体 接种的无菌操作:酒精灯灼烧 (4)试管苗的形成 愈伤组织:细胞排列疏松而无规则,高度液泡化,呈无定形状态,薄壁细胞。 无菌操作,至关重要 超净工作台 原因:防止受到微生物污染。 什么是脱分化? 脱分化:由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程。 实质:已经分化的细胞失去其特有的结构和功能变成具有未分化细胞(胚性细胞)特征的过程。 不需要光照 什么是再分化? 再分化:脱分化产生的愈伤组织继续进行培养又可以重新分化成根或芽等器官。 需要光照 脱分化 再分化 胚状体:愈伤组织通过液体悬浮培养分散成单个胚性细胞,再分化而发育成胚状体。 愈伤组织→胚状体 愈伤组织形态发生的途径 不定芽方式 胚状体方式 诱导芽和根的分化 特别注意:适量的激动素和细胞分裂素配比可以诱导芽的分化;适量的吲哚乙酸及适当减除其他某些激素可以诱导生根。 培养基中植物激素的种类及其浓度的配比 (5)试管苗的驯化和移栽 培养室里试管苗大规模培养 移栽至大田 植物细胞全能性的体现 植物体的每个生活细胞,即使是已经高度成熟和分化的细胞,都保持了恢复到分生状态的能力,都具有遗传上的全能性。 由于不同种类植物或同种植物的不同基因型个体之间遗传性的差异,细胞全能性的表达程度大不相同。 原生质体培养 获得原生质体:在0.5~0.6 mol/L的甘露醇溶液(较高渗透压防止原生质体吸水胀破)环境下用纤维素酶和果胶酶处理。 球形的原生质体 植物体细胞杂交 植物体细胞杂交:①将两种植物的体细胞融合成一个杂种细胞;②通过组织培养技术将杂种细胞培育成新的植物体。 地
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