2017_2018学年高中生物第3章酶的制备及活力测第1节酶的制备及活力测定学业达标测评中图版选修.docVIP

第一节 酶的制备及活力测定 一、酶的存在及提取 1．酶是在生物体活细胞中合成的。其参与反应部位可以在细胞内，也可以在细胞外。 2．在酶的提取过程中，温度、酸碱性等多种环境条件都可能影响酶的空间结构，导致酶变性，甚至丧失活力。因而提取出的酶首先需要检测酶的活力。 3．酶的活力通常以单位时间内底物的消耗量或者在单位时间内产物的生成量来表示。在测定单位时间内麦芽糖的生成量来检测淀粉酶的活力的实验中，测麦芽糖的产量可用分光光度法。 二、酶活力的测定方法和原理 1．提取酶液：研磨水稻种子时需加石英砂，目的是充分研磨。制取匀浆并离心后，取上清液，其中一份要在水浴中加热，目的是使酶失活。 2．滴加酶液。 3．恒温处理。 4．钝化处理：酶促反应进行一段时间后要向反应液中加物质的量浓度为0.4 mol/L的NaOH溶液，目的是钝化酶的活性，使反应终止。 5．测定吸光值：测定吸光值时要把反应液与2_mL3,5—二硝基水杨酸试剂混匀，并沸水浴5 min，才能产生麦芽糖产物。然后分别移入四支比色杯，用分光光度计在波长520 nm处进行比色。 6．绘制标准曲线。 预习完成后，请把你认为难以解决的问题记录在下面的表格中问题1 问题2 问题3 问题4 一、植物淀粉酶活力的测定 原理：淀粉酶将淀粉水解成麦芽糖。在NaOH和丙三醇存在下，3,5二硝基水杨酸(DNS)与还原糖共热后被还原生成氨基化