影响农杆菌介导玉米愈伤组织遗传转化因素的研究-广西植物.pdfVIP

维普资讯 广 西 植 物 Guihaia 25(2)：142— 144 2005年 3月 影响农杆菌介导玉米愈伤组织 遗传转化因素的研究 农友业 ，何勇强 ，覃 燕 ，RachidLoukehaich2，吴子恺 (1．广西大学农学院，广话南宁 530005；2．广西大学生命科学技术学院，广西南宁 530005) 摘 要：用农杆菌介导玉米愈伤组织的转化，其筛选的结果得到的抗性愈伤组织受玉米愈伤组织的继代时 间、浸染的农杆菌菌液浓度、共培养的温度以及其共培养时间等因素的影响。玉米愈伤继代后 7～9d，农杆菌 浓度为OD600值0．3左右、共培养温度约22℃、培养时间3d时，抗性愈伤的获得率最高。 关键词：玉米；愈伤组织；农杆菌；转化；影响因素 中图分类号：Q943 文献标识码：A 文章编号：1000—3142(2005)02—0142—03 Studyofinfluencefactorsontransformation n ● 一 ‘ 一 一 ’ 0tmalzeembryogeniccallusby Agrobacteriumtumefaciens NONG You—ye，HEYong—qiang ，QING Yan ， RachidLoukehaich2．W U Zi—kai1 (1．AgricultureCollegeofGuangxiUniversity，Nanning530005．China；2．Li，fS Ⅲ “，f TechnologyCollegeofGuang．ziUniversitY，Nanning530005．China) Abstract：EmbryogeniccallUSoftransformationofmaizewasgeneratedbyAgrobaczerium uTnefaciens．The resultshowedthatresistantcallUSregeneratedwasinfluencedbythelengthoftimeofcalluscontinuingcul— ture，concentrationofinfectingA．tumefaciens，CO—culturetemperatureandthelengthofCO—culturetime．The percentageofresistantcallUSregeneratedwasthehighestwhencallUScontinuingculturetimewas8——10d，in- fectingA．thinefaciensconcentrationwas0Dooo一0．3，theCO—culturetemperaturewasabout22℃ andtheCO— CUlturetimewas3d． Keywords：maize；callUS；Agrobacteriumfutilefaciens；transformation；inflHencefactors 玉米(Zea?naysL．)是一种重要的经济作物，具 养获得了转基因植株 以来，农杆菌介导的禾谷类作 有多种遗传特性，其遗传转化的研究一直受到重视。 物的转化研究取得了很大的进展。Koziel等(1993) 到 目前为止，己建立 1i’多种外源基因导人玉米受体 培育出了抗虫的转基因玉米。农杆菌介导的遗传转 细胞的遗传转化方法。其中农杆菌和基因枪在玉米 化有可以转移相对较大的DNA片段，获得较多的 遗传转化中担任着重要角色。大多数单子叶植物不 单拷贝转基因植株，转化效率高等优点(李新征等， 是农杆菌的天然宿主(De等，1976)。因此，农杆菌 2000)，目前已成为研究的热点，在近年玉米的遗传