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尿酸对人尿道成纤维细胞TGF-β1Smad3的影响-第三军医大学学报
尿酸对人尿道成纤维细胞TGF-β1、Smad3的影响
郭 旭,卢根生 (第三军医大学西南医院全军泌尿外科研究所,重庆 400038)
摘 要:目的 方法结果结论
关键词:尿道瘢痕;成纤维细胞;转化生长因子-β1;尿液;尿酸
中图法分类号: 文献标识码:A
Effects of uric acid on TGF-β1 and SMAD3 expression in human urethral fibroblasts
GUO Xu,Lu GEN-sheng (Institute of Urinary Surgery Research, Southwest Hospital, Third Military Medical University, Chongqing 400038, China)
Abstract: Objective To observe the effects of urine on TGF-β1 and Smad3 expression in cultured human urethral fibroblasts and explore the mechanism of urethral scar fibrosis. Methods The human urethral fibroblasts were cultured and stimulated with urine or 350μmol/L uric acid. The mRNA and protein expression of TGF-β1 and SMAD3 were measured by PT-PCR and immuno-fluorescent staining, respectively. Collagen Ⅰ in the supernatant of different groups was detected and compared by ELISA. Results The expression of TGF-β1、 SMAD3 and collagen in human urethral fibroblasts were all increased after stimulated with urine or uric acid. Conclusion The stimulation of uric acid could increase the expression of TGF-β1 and SMAD3. Uric acid probably take part in promotion of urethral scar fibrosis.
Key words: urethral scar; fibroblast; TGF-β1;urine; uric acid
作者简介:郭 旭,男,河北省黄骅人,硕士研究生,医师,主要从事尿道瘢痕方面的研究。电话: (023)
E-mail: guoxu197654@
通信作者:卢根生,电话: (023) 687658741
收稿日期:2009-01-19;修回日期:2009-03-10
尿道下裂术后瘢痕狭窄的发生率较高,往往需要尿道扩张或者再次手术进行治疗,给患者带来了很大的痛苦。目前临床上尚没有确实的方法预防尿道下裂术后瘢痕狭窄的发生。我们在临床工作中注意到,尿道下裂术后尿流改道患者,其尿道瘢痕狭窄的发生率较未改道患者低许多,其机理不十分清楚。大量研究证实TGF-β1在增生性瘢痕纤维化病变发生、发展过程中起关键性作用。Smad3作为TGF-β下游传导信号因子也同样起着重要作用。本研究用尿液和尿酸溶液刺激体外培养的人尿道成纤维细胞,观察成纤维细胞TGF-β1、Smad3表达变化,探讨尿液在尿道瘢痕形成中的作用机制,为临床预防和治疗尿道下裂术后尿道瘢痕狭窄提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 主要试剂
兔抗人多克隆抗体TGF-β1、Smad3购自武汉博士德生物工程有限公司, 羊抗兔荧光二抗(TRITC),购自中杉公司。总RNA提取试剂(RNAiso PLUS)、 RNA PCR Kit (AMV)Ver. 3.0购自TaKaRa公司。人Ⅰ型胶原ELISA试剂盒(美国ADL公司)。DMEM细胞培养基、胎牛血清(Gibco,美国)。
尿液刺激溶液:健康体检者(近期未服用任何药物,且尿常规检查未见异常)尿液。收集24 h尿混匀,滤菌器过滤除菌,按适当比例配制成DMEM溶液,碳酸氢钠调pH值到7.2,配制成10%胎牛血清的尿液刺激溶液,测得尿酸浓度350 μmol/L。
尿酸刺激溶液
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