专题二动物细胞融合与单克隆抗体.pptVIP

动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞形成一个细胞的过程。 动物细胞融合与植物体细胞杂交 * * * 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 20世纪30年代,科学家们相继在肺结核、天花、水痘、麻疹等疾病患者的病理组织中观察到多核细胞。 20世纪70年代，科学家们在蛙的血细胞中也看到了多核细胞的现象，但是受当时科技发展水平的限制，人们对这一现象并没有给予足够重视。 1962年，日本科学家发现日本血凝性病毒能引起艾氏腹水瘤细胞融合成多核细胞的现象。 1965年，英国科学家进一步证实了灭活的病毒在适当条件下也可以诱发动物细胞融合。 后来，科学家又成功诱导了不同种动物的体细胞融合，并且能将杂种细胞培养成活。 如果你观察到这些现象，你能提出问题吗？ 你能大胆的作出假设吗？ 实证 结论： 动物细胞在诱导因子作用下会发生细胞融合 ？ 用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程 细胞核 灭活的病毒 细胞核 你能说一说动物细胞融合的过程吗？ 能否用文字流程图表示细胞融合的过程吗？ ？ 动物细胞A 动物细胞B 灭活病毒PEG、电激等诱导 融合后的细胞进行有丝分裂 一、动物细胞融合 杂交细胞 两个杂交细胞 1、 动物细胞融合的过程----流程图 方法？ 原理？ 几种？ 一、动物细胞融合 融合后形成的单核细胞称为杂交细胞。 2、 动物融合的概念 植物体细胞杂交 动物细胞融合 列表比较植物体细胞杂交与动物细胞融合的异同 一、动物细胞融合 3、细胞融合的意义 突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能，为制造单克隆抗体开辟了新途径。 4、应用： 研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段.特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体。 1、什么是抗体？抗体是如何产生的？ 2、传统的抗体生产方法及缺陷是什么？ 3、B淋巴细胞有什么特点？ 4、单克隆抗体与克隆、抗体什么关系？ ？ 二、单克隆抗体 1、什么是抗体？抗体是如何产生的？ 二、单克隆抗体 抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 浆细胞（免疫的B淋巴细胞、效应B细胞）产生抗体。 抗原 动物体内 刺激 效应B 抗体 抗原不纯 抗体不纯 缺陷：特异性差、纯度低；产量低、反应不够灵敏 2、传统的抗体生产方法及缺陷是什么? 分离抗体 体内产生的特异性抗体多达百万种 每一个效应B淋巴细胞只能产生一种特异性抗体 想方设法一: 筛选单一效应B细胞 二、单克隆抗体 1、单克隆抗体的概念： 由单个B淋巴细胞经过克隆形成的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 单个B淋巴细胞 细胞群 有丝分裂 克隆 抗原 动物体内 刺激 效应B 抗体 抗原不纯 抗体不纯 筛选单一效应B细胞 分离抗体 不能增值产生大量抗体 每一个效应B淋巴细胞只能产生一种特异性抗体 体内产生的特异性抗体多达百万种 设计： 设计出“既能大量增殖又能产生足够数量特异性强的抗体的细胞。” 已知： (1)一种B淋巴细胞只能产生一种特异性的抗体; (2)肿瘤细胞能够无限增殖 设计并交流实验方案： (可用流程图表示) 二、单克隆抗体 想方设法二: 播放科学家的单克隆抗体制备过程 注射抗原 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选，继续培养 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 单克隆抗体 注意观察细胞的种类 诱导融合 选择培养基 筛选，继续培养 克隆能产生抗体的阳性细胞 体外培养否或小鼠腹腔内增殖 动物细胞融合 动物细胞培养 二、单克隆抗体 2、单克隆抗体制备过程----流程图 给小鼠注射特定的抗原蛋白 B淋巴细胞（免疫） 骨髓瘤细胞 杂交细胞 杂交细胞（ B-瘤细胞） 单克隆抗体 杂交瘤细胞 瘤-瘤细胞 B-瘤细胞 B-B细胞 2、单克隆抗体制备过程 二、单克隆抗体 (1）什么是免疫的小鼠?怎样对小鼠进行免疫？ (2)图中的B淋巴细胞有何功能？骨髓瘤细胞有何功能？杂交瘤细胞有何特点？ (3)怎样才能将B细胞与骨髓瘤细胞融合？ (4)融合后可能有几种类型的细胞? (5) 两次筛选的目的是什么？ (6) 培养杂交瘤细胞的方式有哪两种？ (7)制备过程中应用哪些细胞工程技术手段？ 二、单克隆抗体 作为诊断试剂。准确识别各种抗原物质，并与特异性结合。 优点：准确、高效、简易、快速 例如“早早孕诊断试剂盒”。 用于治疗疾病和运载药物。 （作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”治疗肿瘤） 3、 单克隆抗体的应用 本节小结 两个过程 动物细胞融合过程