植物组培脱毒技术及在花卉上应用.docVIP

组织培养技术在名贵花卉上的应用前景 摘要：综述了组技术的形成、研究进展、意义及其应用植物组培脱毒技术的培养条件，并重点阐述了组方法及其在花卉上的应用以及病毒检测的重要性，最后浅析了组技术存在的问题及展望。 关键词：；花卉；应用；病毒检测1组技术概述 1．1组技术的形成 危害植物的病毒、植物菌原体、类细菌有几百种 ，果树、花卉、蔬菜等植物病毒也不下500多种，绝大多数植物种类是靠无性繁殖的，由于病毒通过无性繁殖传递，在母体内逐代积累，种性退化严重，表现为植物生长受到抑制，形态畸变，产量下降，品质变劣，严重时只好拔除病株，因而造成很大经济损失，而目前生产上对病毒病的防治尚无特效药物。自从2O世纪5O年代发现通过植物组织培养的方法，可以脱除严重患病毒病植物的病毒，恢复种性，提高产量、质量，组织培养脱毒技术便在生产实践中得到广泛应用，且有不少国家已将其纳入常规良种繁育体系，有的还专门建立了大规模的无病毒苗生产基地。 1．2组技术研究进展 white于1943年首先发现，在感染烟草花叶病毒的烟草植株生长点附近病毒的浓度很低，甚至没有病毒，并且病毒的含量随植株部位和年龄而异。Morel等在这个启示下，于1952年利用感染花叶病毒的大丽菊茎尖分生组织培养，得到了无毒植株 。自1952年以来，通过茎尖分生组织培养或热处理与分生组织培养结合的方法获得成功的实例有100余种，其中最成功的实例之一是马铃薯的脱毒培养Ⅲ 。随着植物细胞培养技术的发展，2O世纪5O年代末通过愈伤组织培养脱毒获得成功。7O年代初植物原生质体培养成完整的植株，为利用原生质体培育无毒植株提供了可能性。1975年Shepard_5 通过对瘟染病毒的烟草原生质体的培养得到了无毒植株。1972年Navarro等将果树嫁接方法与茎尖分生组织培养法两者有机结合，创立了一种新的植物组织培养脱毒技术，即茎尖显微嫁接法。这一技术的创立，为果树的无病毒化开辟了一条新的途径。近几年来，应用上述技术在一些很难脱毒的植物上，如菊花、唐菖蒲、矮牵牛、球根鸢尾、风信子、水仙、文心兰、香石竹等都获得了不同程度的成功。 1．3 研究组技术的意义 通过组技术来生产脱毒苗可以实现防治目的，可以消除危害植物的病毒、植物菌原体、类细菌对植株的危害，使植株原来的一些优良性状重新表现出来，同时由于消除了病毒的影响，植物的生长性能大大增强，能有效提高植物生长指标和经济指标。研究表明，脱毒试管苗比常规苗有更好的生长性能，较高的商品价值和生产利用价值。花卉苗木脱毒后花色鲜艳，品质优良，提高了其观赏价值和商品 性；经济林和用材林苗木脱毒后，能保持其优良性状，生长迅速，增加结果量，提高果实品质和木材利用率；农作物脱毒后表现出生长良好，单位产量和质量提高，市场竞争力增强，达到增产增收的目的，而且如果脱毒苗移栽后管理得当，防治措施做得好，再次感染病毒病的机率比较小，因此植物组培脱毒技术显得非常重要。 1．4 培养条件 运用于脱毒的组培条件及培养基种类很多。主要生态因子：光照强度一般在1000～2000 lx，日照时8～12小时；温度(24±1)℃ ；湿度7O ±5 ；pH值5．8±0．1；培养基有MS、White、B5、N6等为主体的添加培养基，较为广泛应用的是MS培养基添加2，4-D，6-BA，NAA等。其中愈伤组织诱导培养基以MS添加6-BA 0.5～2 mg／L，2，4-D 0.5-2 mg／L ,NAA 0.2～0.5 mg／L为宜；分化培养基以MS添加6-BA 0.5～ 3 mg／I ，2，4-D 1～ 2 mg／L，NAA 0.2～0.5 mg／L为宜；生根培养基以1／2MS添加NAA 0.2～0.5 mg／I 为宜。此外，4～5 mg／L PP 有利于芽的分化，0.3 mg／L ABT在生根过程中也较多运用。常见的激素组合是MS+6-BA+NAA或MS+ 6-BA+2，4～D。此外，也有许多单独添加植物激素的情况，但所用浓度略微偏高 。作为生长激素主要有IAA、IBA、NAA、2，4-D，细胞分裂素主要有6-BA、BAP、KT、ZT、GA ，一般来说，较高浓度的细胞分裂素促进芽的形成而抑制根的形成，而高浓度的生长素则利于根的形成而抑制芽的形成。 2组方法及其在花卉上的应用 2．1 茎尖培养脱毒 茎尖培养是切取茎的先端部分或茎尖分生组织部分进行的无菌培养。最先开始采用的是Robbins，于1922年切取无菌发芽植物的芽先端长约1 cm部分，接种到琼脂培养基上培养。后来，White对番茄根尖培养也进行了研究。在百合上，利用茎尖培养获取无病毒植株或获得脱毒种球,能有效消除百合潜在病毒(LSV)、黄瓜花叶病毒(CMV)等病毒病危害，促进生长。香石竹一旦感染病毒病就不能治愈，目前解决此问题的较为行之有效的方法是通过香石竹的茎尖