牦牛乳中主要过敏原的分离纯化-哈尔滨工业大学学报.pdfVIP

第４４卷　第４期 哈　尔　滨　工　业　大　学　学　报 Ｖｏｌ４４ Ｎｏ４ 　 　 ２０１２年４月 ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＨＡＲＢＩＮＩＮＳＴＩＴＵＴＥＯＦＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ Ａｐｒ．２０１２ 　　　　　　 牦牛乳中主要过敏原的分离纯化 １ １ １ ２ ２ １ 李海梅 ，马　莺 ，崔艳华 ，汪加琦 ，李启明 ，何胜华 （１．哈尔滨工业大学 食品科学与工程学院，１５００９０哈尔滨；２．新希望乳业有限公司研究开发中心，６１００４１成都） 摘　要：为研究牦牛乳蛋白质的过敏性，用化学方法分离牦牛乳中主要的过敏原蛋白质，采用快速蛋白纯化 系统（ＦＰＬＣ）结合凝胶层析技术对分离出的蛋白质进行纯化．在牦牛脱脂乳中添加１０％醋酸至酪蛋白的等 电点ｐＨ４６，使酪蛋白和乳清蛋白分离．根据酪蛋白在尿素溶液中的溶解度和对钙的敏感性不同，对酪蛋白 进行粗分级，得到 ｓ酪蛋白和 酪蛋白．应用离子交换色谱和葡聚凝胶ｓｅｐｈａｄｅｘＧ１００进一步纯化粗分级 α β 得到的酪蛋白，得到 ｓｃａｓｅｉｎ和 酪蛋白．以柠檬酸钠为螯合剂、在低ｐＨ并有盐存在的条件下从酸乳清中 α β 分离出 乳球蛋白，ＦＰＬＣ纯化后用ＲＰＨＰＬＣ检测其纯度，得到 ｓｃａｓｅｉｎ和 酪蛋白纯度分别为８７１３％和 β α β ８８５８％，乳球蛋白的纯度为８０００％． β 关键词：牦牛乳；酪蛋白分离；乳球蛋白分离；快速蛋白纯化色谱 β 中图分类号：ＴＳ２５２ 文献标志码：Ａ 文章编号：０３６７－６２３４（２０１２）０４－００８０－０６ Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｍａｊｏｒａｌｌｅｒｇｅｎｓｉｎｙａｋｍｉｌｋ １ １ １ ２ ２ １ ＬＩＨａｉｍｅｉ，ＭＡＹｉｎｇ，ＣＵＩＹａｎｈｕａ，ＷＡＮＧＪｉａｑｉ，ＬＩＱｉｍｉｎｇ，ＨＥＳｈｅｎｇｈｕａ （１．ＳｃｈｏｏｌｏｆＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＨａｒｂｉｎＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１５００９０Ｈａｒｂｉｎ，Ｃｈｉｎａ； ２．ＲｅｓｅａｒｃｈａｎｄＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔＣｅｎｔｒａｌｏｆＮｅｗＨｏｐｅＤａｉｒｙＣｏｍｐａｎｙ，６１００４１Ｃｈｅｎｇｄｕ，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅｍａｊｏｒａｌｌｅｒｇｅｎｓｉｎｙａｋｍｉｌｋｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄｂｙｃｈｅｍｉｃａｌｍｅｔｈｏｄｓ，ａｎｄｐｕｒｉｆｉｅｄｂｙａｆａｓｔｐｒｏｔｅｉｎ ｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＦＰＬＣ）ｃｏｍｂｉｎｅｄｇｅｌｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｉｎｏｒｄｅｒｔｏａｎａｌｙｚｅａｌｌｅｒｇｅｎｉｃｉｔｙｏｆｐｒｏｔｅｉｎｉｎｙａｋ ｍｉｌｋ．Ｃａｓｅｉｎａｎｄｗｈｅｙｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄａｆｔｅｒａｄｊｕｓｔｉｎｇｉｓｏｅｌｅｃｔｒｉｃｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｎｇｏｆｓｋｉｍｍｅｄｍｉｌｋｔｏ４６ｂｙａｄｄｉｎｇ １０％ ａｃｅｔｉｃａｃｉｄ．Ｂａｓｅｄｏｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙｉｎｕｒｅａｓｏｌｕｔｉｏｎｓａｎｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｏｆｃａｌｃｉｕｍ， ｓ α ｃａｓｅｉｎａｎｄ ｃａｓｅｉｎｗｅｒｅｓｅｐａｒａｔｅｄｆｒｏｍｗｈｏｌｅｃａｓｅｉｎ．Ａｎｄｔｈｅｎ，ｔｈｅｃｒｕｄｅｆｒａｃｔｉｏｎｓｏｆｓ