芝麻过敏原pcr检测方法 establishment of pcr method for detecting sesame allergen.pdfVIP

第28卷第2期 ，00DMAC咖吧RY V01．28，No．2 201 2年3月 Mar．20】2 芝麻过敏原PCR检测方法 EstablishmentofPCRmethodfor sesame detectingallergen 张文举 许庆金 邓志瑞 陈 沁 ZHANG XU DENGZhi—ruiCHENQin Wen-juQing—jin (上海大学生命科学学院，上海 200444) (School 200444，China) ofL咖Sciences，ShanghaiUniversity，Shanghai 摘要：芝麻是重要的食品过敏原之一，微小剂量即可引起严 地检测食品中可能含有的芝麻成分是防止芝麻过敏的有效 重的过敏反应。针对芝麻过敏蛋白一2S白蛋白的基因序列 手段。目前主要检测芝麻过敏原的方法有SDS—PAGE、 设计PCR扩增引物，建立并优化芝麻过敏原检测的普通聚 合酶链式反应(PCR)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real— 但食品加丁易导致蛋白质空间构象的破坏，影响检测准确 timePCR)方法。结果表明，两种方法的最低检测限分别为 性；同时有研究”“”1证实变性后的部分蛋白可与抗体结合引 0．1，0．01DNA，该方法特异性良好，成本较低，具有一定 ng 起假阳性，此外，上述方法存在检测周期较长，不稳定性因素 的应用价值。 关键词：芝麻；过敏原；聚合酶链式反应；实时荧光定量聚合 多，。r作罱大等缺点El：1]。而食品中存在的基因组DNA更稳 酶链式反应；2S白蛋白 定且不易受食品加工的影响，因此基于基因组DNA开发的 Abstract：Sesameisan food dosescan importantallergen；low—level PCR技术在食品检测中的成功应用在一定程度上可解决上 causesevere reactions．Inthis werede allergic paper，PCRprimers 述问题。鉴于此，本试验针对芝麻中的主要过敏原一2S白 basedonsesame signed allergyprotein(2Salbumin)genesequence． 蛋白的基因序列设计引物，建立了用于芝麻过敏原检测的 andconventionalPCRandReal--timePCRwereestablishedand opti mized．ThelowestDNAcontentthatcanbedetectedforconvention—PCR方法。 alPCRWSS0．1 and0．0l for ng ng real—timePCR，respectively．The 1材料和方法 ofthemethodsis andcanbewidelyused． specificity good