植物组织培养技术刘弘63章节.pptVIP

3.心叶组织培养 (1)取材、消毒与接种　取茎端生长锥，用75％酒精将呈卷筒状的幼叶浸泡消毒30s，无菌水冲洗2次后，在无菌条件下剥除外部叶鞘，留下直径为0.5cm的心叶，横切成1～2mm的薄片，接种到培养基中。(2)初代培养　心叶愈伤组织诱导培养基可采用MS＋2,4-D3.5mg/L＋蔗糖30g/L＋琼脂0.7％。 小贴士.eps 3.心叶组织培养 线.eps (3)继代增殖扩繁　将诱导出的丛生芽苗转入增殖培养基上增殖扩繁，增殖培养基为改良MS(即去掉维生素的MS)+6-BA5.0mg/L＋NAA0.05mg/L＋蔗糖30g/L，并随着继代次数的增加，添加6-BA与NAA的浓度逐渐下降，在增殖培养基中含有较低浓度的生长素与细胞分裂素，可以培育健壮的丛生芽苗。(4)生根培养及驯化移栽　选取生长健壮的丛芽苗切割成单苗转接到生根培养基上诱导生根，待根系发育良好，即可进行驯化移栽。1.砧木种子处理方法正确，苗龄合适。 3.心叶组织培养 2.茎尖剥离方法正确，大小合适。3.微嫁接方法正确，成活率高。1.材料与试剂2.仪器与用具1.砧木准备(1)砧木种子消毒　选取充实饱满、无病虫的枳壳、枳橙等种子，用自来水冲洗干净，再用纱布包好，放入45℃温水中预泡5min，再用55℃热水浸泡50min。 小贴士.eps 3.心叶组织培养 线.eps (2)砧木苗培养　在超净工作台上，用手术