DAB染色液（放大聚合物法）说明书-福州迈新生物技术开发有限公司.PDFVIP

DAB 染色液（放大聚合物法）说明书 【产品名称】 通用名称：DAB 染色液（放大聚合物法） 英文名称：DAB Detection Kit （Amplifier Polymer ） 商品名称：EliVision Super DAB 【包装规格】 60 人份/盒；150 人份/盒；180 人份/盒；1100 人份/盒 【预期用途】 本司生产的 DAB 染色液 （放大聚合物法），用于显示鼠源和兔源性一抗，对常规经福 尔马林固定、石蜡包埋组织切片中的靶抗原进行染色，适用于在生物显微镜下观察。 【检验原理】 首先是反应放大剂促使高敏型酶标抗小鼠/兔 IgG 聚合物与组织切片上的一抗连接；第 二聚合物酶与抗小鼠/兔IgG 放大剂连接，再加入DAB 显色液，聚合物上的辣根过氧化酶部 分可以催化DAB 显色液中的 H O 分解，使联苯胺氧化变成联苯亚胺，使组织切片中一抗 2 2 结合的抗原位点上出现黄色或棕黄色着色，达到定位抗原的目的。 【主要组成成份】 试剂 1： 内源性过氧化物酶阻断剂 6ml/瓶×1 15ml/瓶×1 18ml/瓶×1 110ml/瓶×1 试剂2 ：反应放大剂 6ml/瓶×1 15ml/瓶×1 18ml/瓶×1 110ml/瓶×1 试剂3：高敏型酶标抗小鼠/兔IgG 聚合物 6ml/瓶×1 15ml/瓶×1 18ml/瓶×1 110ml/瓶×1 试剂4A ：稳定型DAB 缓冲液 12ml/瓶×1 30ml/瓶×1 36ml/瓶×1 220ml/瓶×1 试剂4B ：稳定型DAB 底物 1ml/瓶×1 1.5ml/瓶×1 2ml/瓶×1 11ml/瓶×1 试剂4C ：稳定型DAB 色原 1ml/瓶×1 1.5ml/瓶×1 2ml/瓶×1 11ml/瓶×1 试 管：DAB 显色液配制管 1 支 1 支 1 支 1 支 不同批号染色液各组成成份不可互换使用。 本产品未提供如下试剂：二甲苯、乙醇（无水、95%、85%）、蒸馏水、中性树胶、一抗、 阳性质控片、苏木素、PBS 缓冲液。 【储存条件及有效期】 2-8℃避光保存，不得冻存。自检定合格之日起有效期为12 个月。 使用时，采取单支试剂即拿即用的原则，盒中其余组分在2-8℃的冰箱保存。单支试剂 在每次使用后，应立即放回盒中。 按说明书配制成的DAB 显色液在避光条件下保存，24 小时内有效。 【样本要求】 新鲜活检或外科样本组织，中性福尔马林固定，固定时间8-24小时，参照 《临床技术操 作规范 病理学分册》要求取材、脱水、石蜡包埋并制成蜡块。 组织切片厚度为3–5 μm 黏附在多聚赖氨酸玻片上，放入56–60°C 干燥箱中加热两个小 时后，移出放置冷却至室温。如果切片在室温下 （18–28 ℃）保存，为了良好地重现组织中 抗原分布情况，要在３个月内完成染色。 【检验方法】 1 检验所需仪器、设备 移液器、免疫组化油笔、计时器、干燥箱、孵育盒、染色架、盖玻片、生物显微镜、洗瓶。 2 溶液配置 1 DAB显色液：DAB显色液需要在使用前配制。配制方法：在配备的小试管中依次滴加稳 定型DAB缓冲液1ml，稳定型DAB底物50-100μl，稳定型DAB色原50-100μl，以配制DAB显 色液。配置好的DAB显色液避光存放，24小时内有效。 3 试验温度条件：18-28 ℃ 4 试验步骤 a) 脱蜡和水化 石蜡切片置于新鲜的二甲苯中，浸泡15分钟×2次， 除去多余的液体后，置无水乙醇中，浸泡3分钟×2次;