月季响应黑斑病的早期差异表达基因分析.pdfVIP

园艺学报，2015 ，42 (4) ：731 –740. Acta Horticulturae Sinica doi ：10.16420/j.issn.0513-353x.2014-0894；http ：//www. ahs. ac. cn 731 月季响应黑斑病的早期差异表达基因分析 1,2 1 1 1 1,* 刘瑞峰 ，刘 强 ，张非亚 ，袁晓娜 ，贾桂霞 1 （北京林业大学园林学院，花卉种质创新与分子育种北京市重点实验室，国家花卉工程技术研究中心，北京 100083 ； 2 中南林业科技大学林学院，长沙 410004 ） 摘 要：为了获得月季抗黑斑病的相关基因，探究月季抗病分子机制，以月季高抗黑斑病品种‘粉 和平’叶片为材料，采用单孢子离体接种法对其接种黑斑病菌，以接种 24 、48 和 72 h 的cDNA 等量混合 样为检测子，以相应对照的 cDNA 混合样为驱动子，构建抑制差减杂交文库。挑选 200 个阳性克隆进行 测序、BLASTx 比对分析，获得 37 条非冗余 EST 序列，其中 32 条序列在蛋白数据库中具有同源序列。 将获得的 EST 序列导入相应样本的转录组测序数据库，以其在两个样本中的 RPKM 比值作为基因相对表 达量。结果表明，接种病原菌后，上调表达基因涉及信号识别、离子转运、活性氧清除、光呼吸途径及 苯丙烷代谢等方面，其中以活性氧清除、光呼吸途径和苯丙烷代谢途径的基因数最多。这一结果说明月 季抗病是通过多基因的协同作用实现的，活性氧清除、光呼吸途径和苯丙烷代谢途径在月季抵抗黑斑病 菌过程中发挥重要作用。 关键词：月季；黑斑病；抑制差减杂交；活性氧清除；光呼吸；苯丙烷途径 中图分类号：S 685.12 文献标志码：A 文章编号：0513-353X （2015 ）04-0731-10 The Analysis of Differential Expression Genes for Rose Early Responding to Black-spot Disease 1,2 1 1 1 1,* LIU Rui-feng ，LIU Qiang ，ZHANG Fei-ya ，YUAN Xiao-na ，and JIA Gui-xia 1 （Beijing Key Laboratory of Ornamental Plants ，Germplasm Innovation and Molecular Breeding，National Engineering Research Center for Flowers ，College of Landscape Architecture，Beijing Forestry University ，Beijing 100083，China； 2College of Forestry，Central South University of Forestry and Technology，Changsha 410004 ，China ） Abstract ：Black-spot disease is the most serious disease for roses. In order to isolate the genes related with the rose resistance and further to explore the interaction molecule mechanism between rose and Diplocarpon rosae Wolf. ‘Pink Peace ’as the high resistance variety in the preliminary screening was selected as the material，the