HPLC法测定平胃散中聚乙炔类成分.docVIP

HPLC法测定平胃散中聚乙炔类成分 　　[摘要] 目的 应用RP-HPLC方法，对平胃散中苍术素、（4E，6E，12E）-十四癸三烯-8，10-二炔-1，3-二乙酸酯峰等两种聚乙炔类成分同时进行含量测定。 方法 反相高效液相色谱法，色谱柱promosll-C18（4.6mm×250mm，5μm），柱温25℃，检测波长：340nm，流速：1.0mL/min，流动相：乙腈-水，梯度洗脱。 结果 苍术素在0.052～248.5mg/L（r=0.9997）呈良好线性关系，（4E，6E，12E）-十四癸三烯-8，10-二炔-1，3-二乙酸酯峰在0.052～251.0mg/L （r=0.9996）呈良好线性关系，回收率分别为99.2%和99.3%，RSD为0.72%和0.64%（n=6）。 结论 建立一种同时测定平胃散中两种聚乙炔类成分的质量评价方法，其结果准确，重现性好，具有一定参考价值。 [关键词]平胃散；聚乙炔类化合物；苍术素；（4E，6E，12E）-十四癸三烯-8，10-二炔-1，3-二乙酸酯 [中图分类号] R284 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616（2013）16-49-03 平胃散最早记载于《简要济众方》，后完备于《太平惠民和剂局方》卷3[1]，其功效燥湿健脾，行气和胃。主治湿困脾胃症。处方由君药苍术（麸炒）配以厚朴（姜炙）、陈皮、甘草4味组成，为全面提高药品质量标准，保证临床用药安全、有效，本实验采用高效液相色谱法对平胃散中的苍术素和（4E，6E，12E）-十四癸三烯-8，10-二炔-1，3-二乙酸酯两种聚乙炔类成分进行了含量测定。 1 材料与方法 1.1 仪器 手提式粉碎机（浙江中药机械有限公司）；Sartorius CP225D型电子天平（十万分之一，德国Sartorius公司）；AR2140电子分析天平（上海奥豪斯公司）；KH-300P型超声波清洗器（昆山禾创超声仪器有限公司）；高效液相色谱仪为Angilent 1100系列：四元泵、在线脱气机、柱温箱、Angilent 1100化学工作站；Promosil C18（4.6mm×250mm，5μm）色谱柱（Bonna-Agela technologies）。 1.2 试剂和药材 苍术素和（4E，6E，12E）-十四癸三烯-8，10-二炔-1，3-二乙酸酯峰对照品（上海中药标准化研究中心，纯度大于 98%）；乙腈（色谱纯，瑞典欧森巴克化学公司）；甲醇（色谱纯，天津市科密欧化学试剂有限公司）；娃哈哈纯净水（杭州娃哈哈集团有限公司）；其余试剂均为分析纯；苍术（麸炒）、厚朴（姜炙）、陈皮、甘草（炙）均购自北京同仁堂大药房大连分店，经辽宁中医药大学鉴定教研室李峰教授鉴定，均符合《中国药典》规定。 2 方法 2.1 对照品溶液的制备 分别精密称取苍术素和（4E，6E，12E）-十四癸三烯-8，10-二炔-1，3-二乙酸酯峰对照品适量，加甲醇配成质量浓度分别为497mg/L和502mg/L的储备液；不同浓度的对照品溶液的配制均用以上储备液混合并用甲醇稀释，定容，微孔滤膜（0.45μm）滤过，即得对照品混合溶液。以上溶液均密封避光保存备用。 2.2 供试品溶液的制备 取苍术24g，厚朴18g，陈皮12g，甘草6g，四种药材混合粉碎（过60目筛）去，取约0.5g，精密称定，置于具赛锥形瓶中，加入甲醇20mL，密塞，超声提取60min，取出，放至室温后滤过，滤液经减压旋蒸浓缩后，移至5mL量瓶中，用甲醇定容至刻度线，摇匀，静置。取溶液过0.45μm微孔滤膜，作为供试品溶液备用，整个过程要求避光。 2.3 阴性液的制备 取厚朴18g，陈皮12g，甘草6g，三种药材混合粉碎（过60目筛）去，取约0.5g，精密称定，置于具赛锥形瓶中，加入甲醇20mL，密塞，超声提取60min，取出，放至室温后滤过，滤液经减压旋蒸浓缩后，移至5mL量瓶中，用甲醇定容至刻度线，摇匀，静置。取溶液过0.45μm微孔滤膜，作为阴性对照溶液备用，整个过程要求避光。 2.4 色谱条件 色谱柱promosll-C18（4.6mm×250mm，5μm）；流速：1.0mL/min，柱温：25℃；检测波长：340 nm；进样量为20μl；流动相：乙腈（A）-水（B），梯度洗脱程序：48%A（8min）-54%A（7 min）-85%A（13 min）。理论塔板数以苍术素计不低于8000，以（4E，6E，12E）-十四癸三烯-8，10-二炔-1，3-二乙酸酯峰计不低于8000。 3 结果 3.1 系统适应性试验 取阴性对照溶液、二合一对照品溶液和供试品溶液，按2.4项色谱条件下进样，其色