3.显微镜直接计数法的.ppt

实验三、微生物数量的测定 一、实验目的： 掌握使用血球计数板进行微生物显微镜直接计数的方法 了解微生物数量测量的几种方法、原理及其应用 二、实验原理 常用的微生物细胞数目的检测法 血球计数板法 平板菌落计数法 干重法 比浊法等 干重法 将一定量的菌液中的菌体通过离心或过滤分离出来，然后烘干至恒重(干燥温度可采用105℃、100℃或80℃)、称重。一般干重为湿重的10%—20%。 注：该法适合菌浓度较高的样品。 比浊法 在一定范围内，菌悬液中的细胞浓度与混浊度成正比，即与吸光值成正比，菌数越多，吸光值越大。因此，借助于分光光度计，在一定波长下测定菌悬液的光密度，就可反应出菌液的浓度。该法适合测定大量的细胞。 显微镜直接计数法 利用血球计数板在显微镜下计数是常用的一种微生物计数法 优点：直观、快速 缺点：误差较大，不适合细菌计数（太小） 其原理与计数板的构造有关 每块计数板上有两个计数室 （正方形），盖上盖玻片后容积是一定的（0.1mm3），深为0.1mm，边长为1mm，其上面有精确的刻度。 我们采用的是25×16的，计数时查5个中方格的总菌数。如图： 计算：1个计数室的总菌数=A/5×25×B 1g（ml）样品中的总菌数=A/5×25×10×1000×B =50,000A×B个 特别注意 血球计数板均有编号，一人一个，务必小心使用，若损坏，需原价赔偿或赔偿原物！ * * Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 其刻度一般有两种规格 16个中方格，每个中方格分25个小格 16×25 25个中方格，每个中方格分16个小格 25×16 计数室 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 5个方格的总菌数 稀释倍数 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 三 实验器材 1.菌种 酵母（Saccharomyces cerevisiae）菌悬液(已稀释100倍) 2.器具 显微镜、血球计数板、吸管、盖玻片。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd