杨浦五角场新王牌补习班微生物的实验室培养(二).docxVIP

第2课时　微生物的实验室培养(二) [目标导读]　1.通过阅读教材掌握配制培养基的步骤和倒平板操作的过程。 2.理解并掌握利用平板划线法和稀释涂布平板法来纯化微生物的方法。[重难点击]　1.掌握制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法。 2.学会用平板划线法和稀释涂布平板法纯化微生物。一　制备牛肉膏蛋白胨固体培养基牛肉膏蛋白胨固体培养基是细菌培养中常用的一种培养基，大肠杆菌的纯化是用该培养基。1.牛肉膏蛋白胨固体培养基的成分及各成分提供的营养培养基组分提供的主要营养物质牛肉膏5.0 g碳源、磷酸盐和维生素蛋白胨10.0 g氮源和维生素NaCl 5.0 g无机盐蒸馏水定容至1 000 mL氢元素、氧元素2.实验过程(1)培养基的配制计算：根据牛肉膏蛋白胨培养基配方的比例，计算配制100 mL培养基时各成分的用量 ↓称量 ↓溶化↓调节pH：1 moL的NaOH、pH试纸，将pH调为7.4 ～7.6↓分装：趁热分装到洁净锥形瓶中↓加棉塞：用棉花不用脱脂棉，脱脂棉吸水,↓包扎：外包牛皮纸，且挂标签(2)灭菌(3)倒平板待培养基冷却至50 ℃左右时，在酒精灯火焰附近进行操作：①在火焰旁右手拿锥形瓶，左手拔出棉塞(如图1)。②使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰，目的是进行灭菌，防止瓶口微生物污染培养基(如图2)。③左手将培养皿打开一条缝隙，右手将培养基倒入培养皿，立刻盖上皿盖(如图3)。④等待平板冷却凝固后，