分子生物学实验原理[资料].ppt

分子生物学实验原理 第一节 分子生物学发展概述 第二节 核酸的提取技术extractive technique of nucleic acid 第三节 核酸分子杂交技术 ⑵ 印迹方法 转移方法不同，可分为 ①斑点或狭缝印迹，即直接将核酸样品点样于固相支持物上； ②虹吸印迹法，利用毛细管虹吸作用，由转移缓冲液带动核酸分子转移到固相支持物上； ③电转印迹法，即利用电场力的作用将核酸带到固相支持物上； ④真空转移法，即利用真空抽滤作用，将核酸分子带到固相支持物上。 锅腮睫抿虑琶滥跃涕伤蜜樱乔灾默麻择椿沮教绢咳企仆诚盂辈痕必诀枉纠分子生物学实验原理分子生物学实验原理 根据要转印核酸品种的不同，又可分为 Southern印迹法：是指将电泳分离的DNA从 凝胶中转移到固相支持物上的过程。 Northern印迹法：是指RNA的印迹过程。 砧抡很知辣尺固裸咽芒吼豌窍龟荷退搂秒愧柑砰蛤蹿恐崔臣亮畅辫珠勘瑶分子生物学实验原理分子生物学实验原理 步骤： a.DNA分子经限制内切酶酶切。酶切变成合适长度的DNA片段（根据实验目的而定，突变检测则短，定性定量则长）。一般理想的是0.5～10Kb，因片段大小直接影响转移效率。 b.在琼脂糖凝胶中进行电泳。分离DNA片段，经EB（溴化乙锭）染色后观察DNA片段大小，并与DN