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血液标本采集与血涂片制备 课件.ppt 58页

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血液标本采集与血涂片制备 课件
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内源性与外源性凝血过程区别在于内源性凝血系统中所需的磷脂来自血小板,而外源性凝血系统中所需的磷脂是组织因子本身所提供的。另外,内源性凝血系统形成活化的Xa过程较为缓慢,约需数分钟之久。而外源性凝血系统形成活化的xa可绕过很多内源性凝血的反应步骤,反应速度较快,数秒钟内即可完成。 因子?I:?纤维蛋白原?     因子?II:凝血酶原?     因子?III:?组织因子?     因子?IV:钙因子(Ca2+)?     因子?V:促凝血球蛋白原,易变因子?     因子?VII:转变加速因子前体,促凝血酶原激酶原,辅助促凝血酶原激酶?     因子?VIII:抗血友病球蛋白A?(AHG?A),抗血友病因子A?(AHFA),血小板辅助因子?I,血友病因子?VIII?或?A,?     因子?IX:抗血友病球蛋白B?(AHG?B),抗血友病因子B?(AHF?B),血友病因子?IX?或?B?     因子?X:STUART(-PROWER)-F,自体凝血酶原C?     因子?XI:ROSENTHAL因子,抗血友病球蛋白C?     因子?XII:HAGEMAN因子,?表面因子?     因子?XIII:血纤维稳定因子 * 抗凝原理:螯合钙离子 使用方法:EDTA K2·2H2O 1.5~2.2mg/ml血液 适用范围:对血细胞形态和血小板计数影响小---适合于多项血液学检查;影响血小板聚集---不宜用做凝血象检验及血小板功能检验。 乙二胺四乙酸(EDTA)盐 二、血液抗凝剂及使用 常用的有草酸钠、草酸钾和草酸铵。 抗凝原理:螯合钙离子,草酸钙沉淀 使用方法:0.1mol/L与血液1:9混合 适用范围:止凝血检验,不适合作细胞形态分析的抗凝剂 草酸盐 二、血液抗凝剂及使用 抗凝原理:草酸钙沉淀 使用方法:草酸钾0.8g +草酸铵1.2g(100ml) 与血液1:10混合(80℃以下烘干)。 适用范围:红细胞检验(红细胞比积、计数),不适于血小板计数和白细胞分类计数 双草酸盐 二、血液抗凝剂及使用 肝素为一种含硫酸基团的粘多糖; 抗凝原理:抑制因子Ⅸa、Ⅷ和PF3之间的作用,加强抗凝血酶Ⅲ灭活丝氨酸蛋白酶,从而阻止凝血酶形成,还能抑制凝血酶的自我催化及抑制因子Ⅹ的作用。 使用方法:每毫升血液(15±2.5)U 肝素 二、血液抗凝剂及使用 优点:抗凝能力强、不影响血细胞体积、不易溶血、能耐高温。 适用范围:红细胞检验(红细胞计数、血红蛋白测定、红细胞比积)和多种生化分析。 肝素 二、血液抗凝剂及使用 抗凝原理:螯合钙离子 使用方法:109 mmol/L浓度与血液1:9混合 适用范围:止凝血检验、血沉、输血保养液(毒性弱) 枸橼酸钠 二、血液抗凝剂及使用 常用抗凝剂的抗凝原理及优缺点 抗凝剂种 类 抗 凝 原 理 优 点 缺 点 EDTA 与钙离子螯合 对血细胞形态和血小板计数影响很少。EDTAK2适合于全血细胞分析和血细胞比容测定 不适合于做凝血象检查和血小板功能实验 双草酸盐 与钙离子螯合 草酸铵和草酸钾(钠)适当比例混合后,不影响红细胞形态和大小 干扰血浆中的离子和酶的测定 肝素 阻止凝血酶形成 抗凝能力强,适用于红细胞检验 和多种生化分析 引起白细胞聚集 染色时产生蓝色背景 枸橼酸盐 与钙离子螯合 用于红细胞沉降率和凝血功能测定,也可以作为输血保养液成分 抗凝力较弱,溶解度较低 二、血液抗凝剂及使用 脱纤维蛋白法: 血液注入有玻璃珠的器皿中,转动,纤维蛋白缠绕凝固于玻璃球,从而阻止血凝块形成。适用于免疫学检验和红斑狼疮细胞检查。 物理方法抗凝 二、血液抗凝剂及使用 血涂片制备主要用于血液细胞学检查、网织红细胞检查和寄生虫学检查。 三、血涂片的制备技术 三、血涂片的制备 三、血涂片的制备技术 手工法制备 仪器法制备 三、血涂片的制备技术 厚薄适宜 头体尾分明 细胞完整 边缘整齐 质量标准 三、血涂片的制备技术 血涂片质量评价 头体尾 分明 厚 薄 均 匀 长 度 适 中 三、血涂片的制备技术 血涂片观察区域选择 三、血涂片的制备技术 四、血液细胞染色技术 经过染色后,血液细胞及其主要结构染上不同的颜色,便于显微镜下观察细胞的内部结构,正确识别各种细胞及其异常变化。 普通染色 细胞化学染色 免疫组化染色 荧光染色 四、血液细胞染色技术 碱性染料:为阳离子染料,能接受质子,与细胞内酸性成分结合,是染胞核的染料。如亚甲蓝、天青。 酸性染料:为阴离子染料,能释放质子。主要有荧烷-氧杂蒽染料和偶氮染料两类,能结合细胞的碱性成分并染色,如血红蛋白、嗜酸性颗粒成分等。 复合染料:同时具有阴、阳离子型的染料如瑞氏染料。 染料分类 四、血液细胞染色技术 瑞氏染色 瑞氏染液由酸性染料伊红和碱

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