第七章 营养代谢病检测技术.pptVIP

染色：通电完毕，镊子取出，浸于氨基黑的染色液中5分钟，立即放入盛有漂洗液的培养皿中，反复漂洗数次，直至背景漂净，滤纸吸干，不要太干。 定量： 取6支试管，编号，分别用吸管吸取0.4N NaOH 4ml； 剪下膜上各蛋白质带及另一空白部位剪一平均大小的薄膜条（空白带的宽度以最窄的条带为准）。将各条分别浸于上述试管内（注意管与蛋白带的顺序），用力摇动，使蓝色洗出，约半小时； 用分光光度计进行比色，波长650nm，以空白薄膜条洗出液为空白对照，读取A、α1、α2、β、γ球蛋白各管的光密度。 结果计算： 光密度总和 T ＝ A+α1+α2+β+γ 白蛋白％＝A/T×100% α1球蛋白％＝ α1/T ×100% α2球蛋白％＝ α2/T ×100% β球蛋白％＝ β/T ×100% γ球蛋白％＝ γ/T ×100% 四、血红蛋白测定（沙利氏比色法） 试剂 转化液：氰化钾50mg，高铁氰化钾200mg，无水磷酸二氢钠114mg， Triton X-100 1.0ml，蒸镏水1000ml。溶解混勾后用滤纸过滤，置棕色瓶中，保存于冷暗处，但勿使结冰，可保存数月。 该液应透明、淡黄色，pH7.0?7.4，以蒸馏水作空白，在540nm处比色，吸光度应小于0.001。 若浑浊、变绿则应废弃。 四、血红蛋白测定（沙利氏比色法）